TMEM106B通过Her2信号通路影响脑膜瘤细胞增殖和血管生成的研究

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目的:观察TMEM106B基因是否影响恶性脑膜瘤细胞的增殖和血管生成能力,并讨论TMEM106B是否通过Her2信号通路发挥作用。方法:1、通过病毒感染沉默TMEM106B基因质粒至恶性脑膜瘤IOMM-Lee和CH157细胞株中。实验分组:第一组:IOMM-Lee空白组(IOMM-Lee-blank);第二组:IOMM-Lee沉默阴性对照组(IOMM-Lee-NC-sh);第三组:IOMM-Lee沉默TMEM106B基因组(IOMM-Lee-TMEM106B-sh);第四组:CH157空白组(CH157-blank);第五组:CH157沉默阴性对照组(CH157-NC-sh);第六组CH157沉默TMEM106B基因组(CH157-TMEM106B-sh)。使用q-PCR、Western blot检测各组细胞TMEM106B mRNA和蛋白表达水平。2、MTT、EdU法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞周期变化情况;小管形成实验检测各组细胞血管生成情况。3、q-PCR和Western blot检测各组细胞Her2、JUN和VEGF mRNA和蛋白表达水平。4、应用Her2抑制剂Afatinib(BIBW2992)干扰恶性脑膜瘤细胞IOMM-Lee和CH157后,q-PCR和Western blot检测Her2、JUN和VEGF mRNA和蛋白表达水平。结果:1、慢病毒转染成功,TMEM106B在mRNA和蛋白水平达到分组要求。2、脑膜瘤细胞株IOMM-Lee和CH157沉默TMEM106B组细胞增殖和血管生成能力均减弱;TMEM106B基因通过影响细胞周期中的G0/G1-S的变化而起作用。3、沉默TMEM106B基因后,恶性脑膜瘤细胞IOMM-Lee和CH157的Her2和JUN基因m RNA和蛋白表达无明显变化。4、干扰Her2基因后,恶性脑膜瘤细胞IOMM-Lee和CH157的TMEM106B和JUN基因m RNA和蛋白表达均减少。结论:1、TMEM106B可以促进恶性脑膜瘤细胞株IOMM-Lee和CH157的增殖和血管生成;2、TMEM106B可能通过Her2信号通路影响恶性脑膜瘤细胞增殖和血管生成。
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