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目的:结核性脑膜炎(Tuberculous meningitis,TBM)简称结脑,是由结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)引起的中枢神经系统非化脓性炎症,是结核病中最严重的形式,死亡率和致残率很高。据统计全世界约1/3人口感染Mtb,其中10%的感染者发展为结核病,仅1%发展为TBM。临床上不同个体暴露在相同的病原学条件下患者罹患结核病的形式差异很大,大部分患者发生肺结核,只有一小部分发生结脑,并且不同结脑患者的临床表现及预后也有很大差异,提示宿主基因在结核性脑膜炎的发生发展中起到重要作用。在感染Mtb患者中,涉及到杀伤结核杆菌的免疫应答基因的突变,可能使得Mtb更容易由肺部扩散到脑组织从而引发结脑,而据文献报道白三烯A4水解酶(LTA4H)基因在涉及机体对结核杆菌免疫应答平衡方面发挥重要的作用。本研究旨在探讨LTA4H基因rs17525495位点多态性与中国结脑患者易感性的关系,并比较不同基因型患者脑脊液TNFα含量差异,及不同基因型结脑患者对糖皮质激素治疗的反应情况。方法:1病例组:选择110例结脑患者,诊断标准参照国际TBM协作组2010结脑诊断专家共识中确诊与很可能标准,参照英国医学研究会(MRC)标准评估其入院时病情轻重,改良Rankin评分评估其出院时预后情况。对照组为105例无血缘关系的健康体检者,既往无结核病史及结核接触史。2对病例组和对照组采集静脉血液提取基因组DNA,采用基因测序的方法对LTA4H基因snp位点rs17525495进行检测。3留取部分结脑患者未进行抗结核治疗前的脑脊液及部分中枢神经系非感染性病变患者的脑脊液,应用酶联免疫(ELISA)方法测定脑脊液中TNFα的含量。4回顾性分析结核患者的住院资料,根据治疗情况,选择激素治疗组33例,非激素治疗组42例,根据改良Rankin评分(Modified Rakin Scale,MRS)来评估不同基因型患者对激素的反应情况。5应用SPSS21.0统计软件对数据进行统计分析。对照组基因型的分布符合哈迪-温伯格平衡定律,有群体代表性。LTA4H基因型及等位基因数用直接计数法,计算各等位基因及基因型频率,采用χ2检验对组间等位基因及基因型频率进行比较。TNFα含量以均数±标准差(x±s)表示,两组间比较用t检验,多组间比较用单因素方差分析或非参数检验。不同基因型对激素的反应差异采用卡方检验。结果:1病例组和对照组:病例组包括110例患者,其中男性77例,女性33例,平均年龄为38.6±16.8岁。健康对照组105例,其中男性65例,女性40例,平均年龄37.5±13.7岁。TBM组和对照组在性别和年龄上无统计学差异。2哈迪-温伯格平衡定律检测(Hardy-Weinberg equilibrium,HWE):对照组LTA4H基因rs17525495位点基因型频率经检验,符合哈迪-温伯格平衡定律(P>0.05)。3 TBM组和对照组LTA4H基因rs17525495位点等位基因及基因型频率分布的比较:TBM组LTA4H基因rs17525495位点等位基因分布与对照组无明显差异。卡方检验结果显示:显性模型,病例组LTA4H基因位点rs17525495基因型CT+TT频率分布与对照组相比无统计学差异(OR=1.405,95%CI:0.816-2.419,P=0.221);隐性模型,TBM组LTA4H基因位点rs17525495 TT型频率分布明显高于对照组(OR=3.092,95%CI:0.964-9.914,P=0.047)。4不同病情TBM患者基因多态性分析:显性模型,III期患者LTA4H基因rs17525495位点基因型CT+TT分布频率高于对照组(OR=2.321,95%CI:1.055-5.107,P=0.034);隐性模型,III期患者LTA4H基因rs17525495位点基因型TT频率分布明显高于对照组(OR=6.546,95%CI:1.784-24.015,P=0.005);I期和II期患者在显性、隐性遗传模型下其基因型分布与对照组相比无明显差异。5不同预后TBM患者基因多态性分析:显性模型:预后好组及预后差组患者LTA4H基因rs 17525495位点基因型CT+TT频率与对照组相比均无统计学差异。隐性模型:预后好组患者LTA4H基因rs 17525495位点基因型TT频率与对照组相比无差异。预后差组患者LTA4H基因rs17525495位点基因型TT频率分布明显高于对照组(OR=6.012,95%CI:1.488-24.289,P=0.015)。6各组间TNFα水平的计较:(1)TBM组患者与对照组患者脑脊液中TNFα水平的比较,TBM组TNFα水平为12.15±1.76 pg/ml,对照组TNFα水平为7.35±0.98 pg/ml,TBM组TNFα含量高于对照组,P<0.05;(2)TBM组不同病情的患者脑脊液中TNFα水平的比较,I期患者TNFα水平为8.27±1.73 pg/ml,II期患者TNFα水平为9.52±2.68 pg/ml,III期患者TNFα水平为22.99±6.23 pg/ml,I期与II期相比无统计学差异,P>0.05,III期患者比II期患者TNFα含量高,P<0.05,III期患者比I期患者TNFα含量高,P<0.05,有统计学意义;(3)TBM组预后好与预后差组脑脊液中TNFα水平的比较,预后好组TNFα水平为8.80±2.25 pg/ml,预后差组TNFα水平为23.28±6.80 pg/ml,预后差组TNFα水平高于预后好组,P<0.05,有统计学意义。(4)TBM组不同基因型患者脑脊液TNFα水平的比较,TBM组LTA4H基因rs17525495 CC型患者脑脊液TNFα水平为7.71±0.89 pg/ml,CT型患者TNFα水平为9.68±1.42 pg/ml,TT型患者TNFα水平为29.18±8.32 pg/ml,CT型患者TNFα水平与TT型患者相比无统计学差异,P>0.05。TT型与CT型患者TNFα水平均比CC型高,P<0.05,有统计学意义。7 TBM组LTA4H基因rs17525495位点不同基因型患者对激素反应情况:CC型激素治疗组患者好转率低于未使用激素组患者,P<0.05;TT型激素治疗组患者好转率明显高于未使用激素治疗组患者,P<0.05;CT型激素治疗组与未激素治疗组患者的好转率相比无统计学差异结论:1 LTA4H基因rs17525495位点基因型TT可能增加结脑发生的风险,携带有TT型基因患者更倾向有较严重的疾病且预后较差。2 LTA4H基因rs17525495位点不同基因型结脑患者其脑脊液中TNFα水平不同,TT型最高,CC型最低,并且病情严重及预后的差患者脑脊液中TNFα水平高于病情轻、预后好者。3 LTA4H基因rs17525495位点不同基因型可能影响患者对激素的反应性,TT型患者更可能在应用激素中获益,而CC型患者可能对激素反应性较差。