雷马曲班对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡及血栓素A2受体表达的影响

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目的:  探索血栓素A2受体(TXA2R)拮抗剂雷马曲班(Ramatroban)对嘌呤霉素氨基核苷(Puromycin aminonucleoside PAN)诱导的足细胞凋亡及TXA2R表达的影响。  方法:  条件永生性小鼠足细胞株随机分为雷马曲班组(A组)、PAN组(B组)、PAN+雷马曲班组(D组)和对照组(C组)。采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平,用CCK8检测细胞增殖活性水平,采用RT-PCR检测TXA2R mRNA表达变化情况,采用Western blot检测TXA2R蛋白表达变化情况。  结果:  利用流式细胞仪检测各组足细胞凋亡情况,其结果为:B组48h的足细胞凋亡率较C组升高(66.8±1.8%vs3.6±0.2%),差异有显著统计学意义(P<0.01);与B组比较,D组凋亡水平下降(54.6±1.3%vs66.8±1.8%),差异有统计学意义(P<0.05);足细胞凋亡率A组略高于C组,但差异无统计学意义(P>0.05)。通过CCK8对细胞增殖活性进行检测,其检测结果为: B组细胞增殖活性水平较C组明显下降(0.361±0.021 vs0.603±0.018),差异有显著统计学意义(P<0.01);D组增殖活性水平高于B组(0.401±0.021 vs0.361±0.021),差异有统计学意义(P<0.05),细胞增殖活性水平C组略高于A组,但差异无统计学意义(P>0.05)。通过RT-PCR检测各组足细胞TXA2R mRNA表达水平,结果显示:与C组比较, B组在48 h足细胞 TXA2R mRNA表达水平明显升高(11.243±0.173 vs8.137±0.005),差异有显著统计学意义(P<0.01);D组TXA2R mRNA表达水平低于B组(9.072±0.024 vs11.243±0.173),差异有统计学意义(P<0.05),A组足细胞TXA2R mRNA表达水平略低于C组,差异无统计学意义(P>0.05)。利用Western blot法检测各组足细胞TXA2R蛋白表达水平,结果显示:与C组比较,B组在48 h的足细胞TXA2R蛋白表达升高(0.543±0.013 vs0.236±0.008),差异有显著统计学意义(P<0.01),与B组比较, D组TXA2R蛋白表达下降(0.325±0.014 vs0.543±0.013),差异有统计学意义(P<0.05),A组足细胞TXA2R蛋白表达水平略低于C组,但无统计学差异(P>0.05)。  结论:  血栓素A2受体(TXA2R)拮抗剂雷马曲班对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的足细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能通过下调血栓素A2受体表达而实现。
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