血管生成是指活体组织在已存在的微血管床上芽生出新的以毛细血管为主的血管系统的过程。自20世纪70年代Folkman提出“肿瘤生长和转移依赖于血管生成”的著名学说以来,抗血管生成成为肿瘤治疗领域的热点问题。血管生成需要多种细胞和分子之间的交互作用,受到多种肽类物质和调节因子的调控,目前已经明确了近20种内源性血管生成促进因子和10余种内源性血管生成抑制因子。随着血管生成机制的逐渐明了,人们也试图通过拮抗内源性血管生成促进因子及其受体或增强内源性血管生成抑制因子活性的方法抑制肿瘤血管生成,达到治疗肿瘤的目的。1988年以来已有20余种血管生成抑制剂进入了临床实验,它们主要通过以下方法被选出:确定靶分子、合成其抗体或抑制剂以阻断其活性(如VEGF抗体);寻找特异的内源性血管生成抑制剂(如endostatin);从现有的临床药物中筛选抗血管生成药物(如IL-12)。目前国内以抑制血管再生作抑制癌转移靶点的中医药研究近几年才刚刚起步,探讨单味抗癌中药抑制血管生成的分子机理研究,国内尚未见报道。 我们采用血清药理学方法,以内皮细胞小管形成实验、体内Matrigel栓测定为手段,从临床验证有效的抗癌单味中药中筛选出有效抑制血管生成的中药——半枝莲。采用Transwell小室共培养、ELISA、转染荧光素酶报告基因等方法,从细胞、分子水平综合研究了半枝莲抑制肿瘤血管生成的作用及其机理。 实验结果如下: 1.有效含药血清半枝莲的筛选:半枝莲、三棱含药血清与空白血清比较在相同浓度体系下能有效抑制体内Matrigel栓中微血管的形成,减少体外HUVEC小管形 成数目(P<0.01),两者均能显著抑制内皮细胞的迁移,以半枝莲效果最佳;但大黄含药血清与空白血清组相比没有显著差异。 2.半枝莲含药血清能抑制体外血管生成:半枝莲含药血清体系达到20%时,对小管形成即有明显影响,不仅小管数目减少,而且管腔不完整,与同浓度空白血