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萝卜是一种常见的十字花科植物,萝卜根茎和芽苗是人们日常大量食用的蔬菜,萝卜籽可入药,中药名称为莱菔子。作为一种十字花科植物,萝卜中含有大量的黑芥子酶及萝卜硫苷,萝卜组织破损后,黑芥子酶与萝卜硫苷充分接触,酶解萝卜硫苷转化生成莱菔素。作为一种异硫氰酸酯,莱菔素可高效诱导Ⅱ相解毒酶,提高人体对致癌物的清除能力,并能够有效抑制癌细胞的生长增殖和杀死癌细胞。本文主要研究莱菔素粗提物的分离制备工艺,莱菔素粗提物的急性毒性,以及莱菔素粗提物的体内外抗癌活性。采用富含萝卜硫苷和黑芥子酶的萝卜籽作为原料,建立了高效的莱菔素粗提物分离制备工艺。研究表明,热压榨预处理可消除水解反应体系中的硫化氢,有效避免新生成的莱菔素发生快速降解,从而实现水解反应体系中莱菔素的有效积累。维生素C可有效还原黑芥子酶分子中的巯基,从而高效的激活黑芥子酶,提高莱菔素的生成速率。莱菔素的生成速率随温度的降低而显著升高,低温有利于莱菔素的酶解生成。黑芥子酶催化萝卜硫苷水解反应的最适pH值是5.0,且有利于酶解反应体系中莱菔素的高效积累。SP-850树脂可快速吸附富集酶解液中的莱菔素,80%乙醇溶液可有效洗脱SP-850树脂中吸附的莱菔素,再通过二氯甲烷萃取莱菔素浓缩液,可获得高含量的莱菔素粗提物。最优分离条件下,莱菔素粗提物产量为9.25 g·kg-1,产品中莱菔素含量为81.5%,分离制备工艺总体收率为88.3%。体外抗癌活性研究表明,莱菔素粗提物可剂量依赖性地抑制NCI-H460、A549、SK-OV-3、Hela、HepG2、MDA453、MCF-7、A375、 BxPC-3和LNCaP癌细胞的体外生长增殖,半数抑制浓度依次为3.22μg·mL-1、7.38 μg·mL-1、7.16 μg·mL-1、3.92μg·mL-1、4.92 μg·mL-1、 6.33μg·mL-1、5.84μg·mL-1、0.964μg·mL-1、3.65μg·mL-1和6.71μg·mL-1.A375癌细胞对莱菔素粗提物最敏感,其半数抑制浓度比其它癌细胞普遍低3～8倍。急性毒性实验表明,莱菔素粗提物对实验小鼠的半数致死量为186.8 mg·kg-1,证实莱菔素粗提物对实验小鼠具有中等毒性。实验小鼠死亡的主要原因可能是莱菔素粗提物对实验小鼠中枢神经系统的强兴奋作用,且莱菔素粗提物对实验小鼠的胃肠道组织具有一定的致损伤作用。研究评价了莱菔素粗提物的体内抗癌活性。实验研究表明,在50 mg·kg-1到250 mg·kg-1 BID剂量下,莱菔素粗提物对A375癌细胞移植瘤生长无明显抑制作用。实验小鼠体内可能具有莱菔素粗提物的快速代谢途径,灌胃给药的莱菔素粗提物很快被代谢清除,显著降低了莱菔素粗提物对实验小鼠的毒性,但同时也显著降低了莱菔素粗提物的体内抗癌活性。