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猪流感(Swine influenza, SI)是由猪流感病毒(Swine Influenza Virus,SIV)引起的一种严重影响养猪业的急性、呼吸系统疾病,是规模化养猪场普遍发生的传染病之一。其特点是发病率高,死亡率低,但常继发其他细菌和病毒的感染,导致疾病加重,死亡率增高。同时,猪还可以作为流感病毒种间传播的中间宿主,因而具有重要的公共卫生学意义。目前防治猪流感的措施主要是疫苗免疫和使用抗病毒药物,但由于流感病毒惊人的变异速度以及西药所产生的耐药性,对于该病的防治面临严峻的考验。因此,筛选安全有效的抗猪流感病毒中药对养猪业发展具有重要意义。本研究的目的在于筛选具有抗流感病毒作用的中药,从中选择抑制效果显著的药物并对其抗病毒机制进行初步探索,研究结果将为进一步研究以及开发有效、特异的防治流感病毒感染的药物奠定实验基础。方法:利用对流感病毒敏感的犬肾细胞株(MDCK细胞)建立抗猪流感病毒单味中药的体外筛选模型。以常规水煎法提取中药的有效成分,制备成0.5g/ml的提取液,以利巴韦林为阳性对照药物,用细胞病变(CPE)观察法、噻唑蓝盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活性,对药物抗猪流感病毒的效果进行评价。首先测试药物在MDCK细胞的毒性作用及最大安全浓度,在安全浓度范围内进行药物的抗病毒筛选试验。通过感染前后均给药的方式,进行初筛试验。通过改变给药时间及作用方式初步探讨药物抗病毒作用环节。最后测定其最小有效浓度。结果显示:药物最大安全浓度在0.24mg/ml~31.25mg/ml之间。其中苦参的最大安全浓度高,31.25mg/ml时仍不表现毒性作用。初筛具有抗病毒效果的是:柴胡、蒲公英、穿心莲、苦参、黄柏、地丁、大青叶、茵陈、野菊花、黄芩、白头翁、连翘、细辛13种。抗病毒作用环节的研究初步表明:(1)能够抵抗病毒吸附的有:穿心莲、苦参、黄柏、大青叶、连翘。其效果均优于利巴韦林。(2)能够干扰病毒复制的有:柴胡、蒲公英、穿心莲、苦参、黄柏、地丁、大青叶、茵陈、野菊花、黄芩、白头翁、连翘、细辛。(3)同时接触细胞能发挥抗病毒效果的有:柴胡、蒲公英、穿心莲、苦参、黄柏、地丁、大青叶、茵陈、野菊花、黄芩、白头翁、连翘,其中蒲公英、苦参、黄柏、地丁、大青叶、黄芩效果优于利巴韦林。(4)起直接杀灭作用的有柴胡、蒲公英、穿心莲、苦参、黄柏、地丁、大青叶、茵陈、野菊花、黄芩、连翘。其中柴胡和苦参效果优于利巴韦林。中药的最小有效浓度分布在0.06~7.8mg/ml之间,其中黄芩的最小有效浓度最低,为0.06mg/ml。药物的治疗指数在1~32之间,其中黄芩的治疗指数最高,为32。