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目的:探讨酶联免疫法检测HBsAg结果检测限的问题,参考CLSI EP17-A文件,按照文件中的方法建立本实验室酶联免疫法检测HBsAg的空白限(LOB)、检出限(LOD)及定量限(LOQ),与常规建立检测限的方法进行对比评价,提高检测结果的准确性,防止弱阳性标本的漏检,为临床实验室酶联免疫法检测HBsAg的检测限的建立提供指导。方法:1.标准曲线的建立收集HBsAg含量为0且HBsAb呈阴性的正常人血清20例混匀,并用雅培公司I2000化学发光免疫分析仪检测证实此混合血清HBsAg含量为0ug/L,将此标本作为稀释液备用。收集已经经标准品校准后的机器检测HBsAg含量为500ug/L的样本倍比稀释成浓度为25.000、10.000、5.000、2.500、1.250、0.630、0.310、0.100(单位ug/L)的低浓度样本,进行ELISA检测,将检测结果绘制成曲线图。2.空白限的建立收集正常人的血清12份,经美国雅培公司I2000化学发光免疫分析仪检测得到HBsAg含量为0,对其进行连续5天的日间检测,对得出的结果根据其分布状态进行统计分析。3.检出限的建立收集已明确HBsAg浓度的病人阳性血清,用正常人的血清将其稀释成为系列低浓度的样本,其理论浓度分别为0.100、0.200、0.300、0.400、0.500,单位为ug/L,介于预期检测浓度的1~4倍,对这5个浓度的样本进行连续12天的日间检测,对得出的结果根据其分布状态进行统计分析。如果是正态分布则采用均值标准差描述,如果是非正态分布则采用百分位数进行描述。4.定量限的建立首先确立本实验室的总误差目标,计算LOD结果测试的总误差,观察其是否小于确定的本实验室的总误差,如果是,则LOQ=LOD;如果不是,则选择比LOD更高浓度的样本进行重复测定40次,计算新浓度水平的总误差,直到新浓度水平的总误差小于目标总误差。结果:参考CLSI EP17-A文件建立的本实验室的LOB、LOD、LOQ的结果分别为0.117ug/L、0.317ug/L、0.500ug/L。结论:参考CLSI EP17-A文件建立的检测限比常规方法建立的检测限要科学,更能满足临床实验室的要求。临床实验室应严格按照要求,定期对每批的试剂的检测限进行验证,以确保这些检测限值的有效性。