新化合物JH42-1对人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制和凋亡诱导作用的体外实验研究

来源 :滨州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaotang111
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目的观察新化合物JH42-1对人宫颈癌细胞株HeLa细胞抑制增殖和诱导凋亡的结果,研究治疗宫颈癌的新药。方法常规培养HeLa细胞,分为空白对照组、实验组和阳性对照组。用不同浓度的JH42-1处理细胞,分别于培养24、48h,显微镜下观察细胞形态学变化,甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;于24、48、72h AnnexinV-EGFP/PI双标记后流式细胞术检测细胞凋亡率;于72h分别AnnexinV-EGFP/PI双标记及Hoechst-33258染色后荧光显微镜观察凋亡细胞。结果1.光镜观察:用30μmol/1JH42-1处理细胞24h,光镜下即可见细胞皱缩变圆,核浓缩。随化合物浓度增加及处理时间延长,形态学变化更加明显,培养液中见大量漂浮细胞。2.MTT检测:JH42-1处理HeLa细胞24、48h,细胞增殖受到抑制。与空白对照组比较,30μmol/1及以上剂量组增殖抑制作用明显(P<0.05),且呈剂量依赖关系。3.流式细胞术检测:JH42-1处理HeLa细胞24、48、72h,可诱导细胞凋亡;30μmol/1及以上剂量组作用24h、20μmol/1及以上剂量组作用48、72h细胞凋亡率较空白对照组明显增加(P<0.05),且存在剂量依赖关系。4.AnnexinV-EGFP/PI双染荧光显微镜观察,JH42-1作用72h可诱导宫颈癌HeLa细胞早期和晚期凋亡;Hoechst-33258染色:JH42-1作用72h后HeLa细胞出现明显的凋亡细胞改变,细胞凋亡率随化合物浓度增加而增加。结论JH42-1明显抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导细胞调亡,有望发展成为抗宫颈癌新药。
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