细胞缺氧是严重烧伤最常见的病理生理现象之一。严重烧伤早期即存在器质性心肌损害,即“休克心”。缺血缺氧与炎症反应失控是“休克心”发生的主要致病因素。线粒体是心肌细胞缺氧损害的核心靶细胞器,线粒体通透性转换孔（mPTP）的开放引起线粒体通透性转换（MPT）,导致线粒体基质膨胀、外膜破裂,凋亡信号分子从内外膜间释放,启动细胞的坏死和凋亡,故mPTP的开放导致线粒体的不可逆损伤是缺氧性心肌细胞损害的关键环节。细胞骨架除了对线粒体胞内定位及分布起一定作用外,还可能参与线粒体呼吸功能的调节过程。在缺氧条件下,心肌细胞骨架较早即发生变化,同时出现线粒体呼吸功能下降。但缺氧导致的心肌细胞微管破坏是否能导致MPT及其中可能的机制尚不清楚。由于微管的完整性对维持线粒体的结构和功能可能具有重要作用,我们推测,在缺氧条件下,微管变化可能会进一步影响线粒体功能,导致MPT的发生,这可能是缺氧导致心肌细胞线粒体功能障碍的重要环节。本研究旨在验证上述设想,明确缺氧对离体培养的心肌细胞微管的损伤效应,探讨缺氧引起的细胞微管破坏能否导致mPTP开放及微管破坏导致其开放可能的机制。一、研究目的:探讨缺氧引起的心肌细胞微管破坏能否导致mPTP开放及微管破坏导致其开放可能的机制。二、材料方法:1.将分离培养的乳鼠心肌细胞在94%N₂,5%CO₂,1% O₂的混合气体中培养,制作缺氧模型。2.将心肌细胞随机分为对照组（常氧组、A组）、缺氧组（B组）、常氧+微管解聚剂组（colchicine,C组）、缺氧+微管稳定剂组（taxol,D组）。3.利用免疫细胞化学染色观察A组、B组、C组、D组细胞0.5h、1h、3h、6h、12h聚合态微管形态,Western blot法检测各组心肌细胞聚合态微管蛋白含量变化。