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癌症是死亡率仅次于心脑血管疾病的第二大杀手,严重危害人类健康与寿命。对于癌症的预防诊断及治疗已是迫在眉睫。本课题以三种癌细胞与荷瘤昆明小鼠为模型,运用细胞生物学、药理学和分子生物学的方法对甘肃中药材活性成分体内外抗肿瘤活性进行了研究,为中药活性成分在临床肿瘤治疗的应用方面提供理论依据。本研究主要内容与结果如下:1.以不同浓度的青蒿素、白藜芦醇、红茂草生物碱、黄芪多糖及黄芪黄酮处理体外培养的He La、A549及Hep G2细胞,观察细胞形态。MTT法检测五种活性成分对三种肿瘤细胞增殖的影响。酶标仪在495nm波长下测各孔吸光值,计算细胞抑制率,确定五种活性成分对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果表明青蒿素、白藜芦醇、红茂草生物碱对He La、A549及Hep G2细胞的抑制率均达75%～85%以上,作用于He La细胞的IC50分布在17.33μg/m L～244.56μg/m L之间,作用于A549细胞的IC50分布在32.04μg/m L～306.34μg/m L之间,作用于Hep G2细胞的IC50分布在31.64μg/m L～501.56μg/m L之间。黄芪多糖与黄芪黄酮对He La及Hep G2细胞抑制率在75%以上,作用于He La细胞的IC50分别为61.19μg/m L、55.10μg/m L;作用于Hep G2细胞的IC50分别为43.54μg/m L和55.39μg/m L。并且显示剂量效应关系。2.以青蒿素、白藜芦醇、红茂草生物碱、黄芪多糖及黄芪黄酮有效作用浓度分别处理He La、A549及Hep G2细胞24h,提取细胞总RNA。根据已知Hs Trx R2、Hs ASK1、Hs Bcl-2、Hs Caspase-3以及内参GADPH基因的保守区设计特异性引物,用荧光定量PCR检测三种肿瘤细胞中Trx R2、ASK1、Bcl-2、Caspase-3m RNA表达。结果表明,与阴性对照组相比,三种肿瘤细胞中黄芪黄酮下调Trx R2m RNA表达并上调ASK1m RNA表达（p<0.05）。红茂草生物碱下调三种肿瘤细胞中Trx R2 m RNA表达（p<0.05）。黄芪多糖下调He La细胞中Trx R2、Bcl-2 m RNA表达并上调ASK1m RNA表达（p<0.05）。红茂草生物碱与黄芪黄酮下调He La、A549细胞中Bcl-2m RNA表达（p<0.05）;白藜芦醇下调Hep G2细胞中Trx R2、Bcl-2 m RNA表达（p<0.05）。红茂草生物碱上调A549、Hep G2细胞中ASK1m RNA表达（p<0.05）。青蒿素上调He La、Hep G2细胞中Caspase-3m RNA表达（p<0.05）;红茂草生物碱与黄芪黄酮上调Hep G2细胞中Caspase-3m RNA表达（p<0.05）。3.取对数生长期小鼠肝癌H22细胞,按照1×108个/0.2m L/只经腹腔注射接种于昆明鼠体内孵育12d腹水传代,无菌抽取腹水,离心收集H22小鼠肝癌细胞,无血清DMEM培养基将H22细胞稀释成1×107/m L,以0.2m L/只接种于受体昆明鼠右侧腋部皮下,建立皮下移植瘤模型。接种第2天APS连续灌胃14d;接种第8天,Emodin连续灌胃14d;DLFA连续腹腔注射14d。末次给药24h后眼眶采血并处死小鼠,剥取瘤体、主要脏器（肝、心、肺、肾）和免疫器官（胸腺、脾脏）进行形态学分析;ELISA方法检测小鼠血清中Trx R、TNF-α、IL-1α、IL-2、IL-6等细胞因子的水平。结果表明,皮下成瘤实验建模成功,一定浓度的黄芪多糖、大黄素及红茂草生物碱在体内均具有较好的抑瘤作用,黄芪多糖抑瘤率达50%以上,大黄素抑瘤率达60%以上,红茂草生物碱抑瘤率达50%以上。与阴性对照组相比黄芪多糖、大黄素给药后降低荷瘤小鼠血清中Trx R含量（p<0.05）;一定浓度的黄芪多糖、大黄素及红茂草生物碱体内明显提高荷瘤小鼠血清TNF-α、IL-2水平（p<0.05）;一定浓度大黄素升高荷瘤小鼠血清IL-1α水平（p<0.05）。4.提取荷瘤小鼠肿瘤组织总RNA,根据已知mus Trx R2、mus ASK1、mus Bcl-2、mus Caspase-3以及内参GADPH基因的保守区设计特异性PCR引物,荧光定量PCR检测肿瘤组织中Trx R2、ASK1、Bcl-2、Caspase-3 m RNA表达。结果表明,与阴性对照组相比,黄芪多糖、大黄素及红茂草生物碱治疗后的小鼠肿瘤组织中Trx R2m RNA的表达明显下调（p<0.05）;黄芪多糖、红茂草生物碱处理组显著下调小鼠肿瘤组织中Bcl-2m RNA表达（p<0.05）。大黄素及红茂草生物碱处理均明显上调小鼠肿瘤组织ASK1m RNA的表达（p<0.05）。黄芪多糖、大黄素及红茂草生物碱处理小鼠肿瘤组织Caspase-3m RNA表达未出现显著性差异（p>0.05）。