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目的：利用siRNA转染技术探讨酪氨酸蛋白激酶Src（Src）在哮喘发病过程中的作用，为利用酪氨酸蛋白激酶Src抑制剂治疗哮喘提供实验依据。 方法：将32只4周龄SD大鼠随机分为4组：正常组、PBS组、空载体组和Src干扰组(siRNA)。动物模型制作：d2、d11和d22予PBS组、空载体组和siRNA组大鼠腹膜注射50ug卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）与2mg氢氧化铝的混合液，共100μL，正常组注射等量生理盐水。d22开始予PBS组、空载体组、siRNA组5％OVA每天雾化20分钟，连续5天至大鼠出现哮喘相关症状，正常组雾化吸入等量生理盐水。siRNA干扰方法：PBS组用磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline，PBS)40ul,空载体组用与实验不相关的随机片段RNAi40ul，siRNA组用浓缩的siRNA40ul，分别与转染试剂混合，于d2、d8、d15和d22尾静脉注射大鼠，正常组注射等剂量生理盐水。实验观察项目：最后一次雾化激发结束后乌拉坦麻醉解剖，留取大鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）、肺组织和支气管组织。对大鼠肺组织及支气管进行固定、包埋后切片，将切片HE染色，光镜下观察组织病理变化。于大鼠肺组织中用Trizol法提取总RNA，去除基因组DNA，再进行反转录，用实时荧光定量PCR（Real time PCR,RT-PCR）法定量检测mRNA表达量，免疫印迹法（Western blot）检测Src蛋白的表达，对BALF进行白细胞(Leukocyte，white blood cell，WBC)计数和嗜酸性粒细胞（Eosinophile granulocyte,EOS）计数。应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测大鼠BALF中白介素-5(Interleukin-5,IL-5)、IL-33及γ-干扰素（Interferon-γ，IFN-γ）的表达水平。用SPSS20.0软件进行统计学分析，所有数据以均数±标准差（一X±S）表示，两组间数据采用t检验方法分析,siRNA组Src mRNA与Src蛋白表达、EOS数量及炎症因子表达的相关性采用Pearson法进行统计学分析，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。 结果：1.各组大鼠肺组织与支气管组织切片HE染色结果显示：正常组大鼠的支气管结构正常，肺泡间隔正常，肺泡腔干净，粘膜下未见炎性细胞浸润；PBS组和空载体组大鼠的气道上皮结构不完整，可见粘液腺增生，杯状细胞分泌亢进，小支气管内可见粘液栓；肺泡结构被破坏，肺泡腔融合，伴有组织水肿，气管壁粘膜下及周围可见大量炎细胞浸润（多为淋巴细胞和嗜酸性粒细胞）；而siRNA组气道上皮结构相对完整，炎症细胞浸润及肺泡结构破坏程度较哮喘组和空载体组明显减轻。2.PBS组和空载体组Src mRNA及Src蛋白的表达无明显差异（均P＞0.05），PBS组、空载体组Src mRNA和Src蛋白的表达明显高于正常组（均P＜0.0001），siRNA组Src mRNA和Src蛋白的表达较PBS组和空载体组偏低（均P＜0.001），较正常组偏高（均P＜0.001）。3.BALF细胞计数结果显示：PBS组和空载体组大鼠中WBC数、EOS数无明显差异（均P＞0.05）；与正常组大鼠相比，PBS组和空载体组大鼠BALF中WBC数、EOS数显著增加（均P＜0.0001）；与PBS组和空载体组相比，siRNA组大鼠BALF中WBC数、EOS数有所减少（均P＜0.001）。4.ELISA法检测大鼠BALF中炎症因子及干扰素结果显示：PBS组和空载体组大鼠BALF上清液中IL5、IL33、IFN-γ表达无明显差异（均P＞0.05）；与正常组相比，哮喘组和空载体组的BALF上清液中IL5、IL33表达明显升高（均P＜0.0001），IFN-γ表达则降低（均P＜0.0001）；siRNA组IL5、IL33的表达低于哮喘组和空载体组，但高于正常组（均P＜0.001），IFN-γ表达高于哮喘组和空载体组，但低于正常组（均P＜0.001）。5.siRNA组WBC、EOS计数以及IL5、IL33的表达和Src蛋白表达与Src mRNA的表达呈正相关，IFN-γ的表达与Src mRNA的表达呈负相关（均P＜0.01）。 结论：siRNA干扰Src基因能够抑制哮喘大鼠磷酸激酶Src的表达，并通过抑制炎症介质的释放、减少炎症细胞的生成从而降低气道炎症程度。