论文部分内容阅读
目的探讨TLR9激活对Hep G2肝癌细胞增殖、侵袭及NF-κB、IRF-7表达的影响。方法1.将Hep G2细胞分为2组:实验组和阴性对照组。实验组用含不同浓度Cp G-ODN(1、4、16μg·m L-1)的培养液培养Hep G2细胞;阴性对照组用Cp G-ODN(0μg·m L-1)的细胞培养液培养Hep G2细胞。采用实时荧光定量PCR法分别检测实验组和对照组Hep G2细胞中TLR9、NF-κB、IRF-7m RNA表达,收集荧光信号,通过PCR扩增曲线取Ct值,计算得出Hep G2细胞中TLR9和NF-κB、IRF-7m RNA的相对表达量;2.实验组用含不同浓度Cp G-ODN(0.25、1、4、16ug·m L-1)的培养液分别培养Hep G2细胞24、48和72h,采用MTT法检测实验组和对照组Hep G2细胞增殖的变化;3.实验组使用含不同浓度Cp G-ODN(1、4、16ug·m L-1)的培养液培养Hep G2细胞24h,Transwell法检测实验组和对照组Hep G2细胞侵袭能力变化。采用SPSS 17.0统计软件处理实验数据,计量资料以X±s表示,对各组进行单因素方差分析,两样本均数多重比较采用LSD-t检验,以P≤0.05为差异有统计学意义。结果1.实验组与阴性对照组比较,Cp G-ODN(4、16μg·m L-1)作用后的Hep G2细胞中TLR9m RNA、NF-κB m RNA、IRF-7 m RNA的表达增高(P<0.05),Cp G-ODN(1μg·m L-1)作用后Hep G2细胞表达的TLR9m RNA、NF-κB m RNA、IRF-7 m RNA与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);2.Cp G-ODN(1、4、16μg·m L-1)激动TLR9后可促进Hep G2细胞增殖,且以48h最为显著,并存在剂量依赖关系,Cp G-ODN(0.25μg·m L-1)组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);3.Cp G-ODN(4、16μg·m L-1)激动TLR9可增强Hep G2细胞的侵袭能力(P<0.05),Cp G-ODN(1ug·m L-1)组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.TLR9的激活可增强Hep G2细胞增殖及侵袭能力2.TLR9可能通过激活NF-k B信号通路促进肝癌细胞生长