猫干扰素omega(FeIFN-ω)是一类具有广谱抗病毒、抗肿瘤活性和具有免疫增强作用的细胞因子。为了研制我国猫干扰素生物制剂及干扰素佐剂，并为研究FeIFN-ω的蛋白结构奠定基础，本研究根据实验室已克隆出的五个FeIFN-ω基因序列，在其成熟肽和终止密码子序列间分别设计了含Bam HI和Hind Ⅲ酶切位点的一对通用引物，采用聚合酶链式反应(PCR)法对这五个新亚型FeIFN-ω进行了亚克隆。扩增的目标PCR产物纯化回收后，经Bam HI和Hind Ⅲ双酶切，插入含有T7启动子的pET-His表达载体并转化大肠杆菌TOP10F’感受态细胞，以含氨苄青霉素(Amp)的LB平板，筛选阳性克隆，并对重组子进行了Barn HI和Hind Ⅲ双酶切鉴定，PCR鉴定和测序鉴定，获得构建成功的五个重组表达质粒pET-His/FeIFN-ω1、pET-His/ FeIFN-ω2、pET-His/ FeIFN-ω3、pET-His/ FeIFN-ω4和pET-His/ FeIFN-ω5。再将构建好的重组质粒转化OrigamiB(DE3)感受态细胞，以含氨苄青霉素的LB平板筛选鉴定重组质粒基因工程菌。经过低温，低浓度IPTG诱导表达后，离心收集菌体、超声波裂解、低温高速离心收集上清，采用Ni-NTA亲和层析纯化r FeIFN-ω，再经SDS-PAGE电泳和Western Blot检测，分析纯化的重组蛋白。并且在猫肾上皮细胞(CRFK)-水泡性口炎病毒(VSV)系统上，采用细胞病变抑制法测定rFeIFN-ω的抗病毒活性。 结果表明，本研究成功地亚克隆了五个新亚型的FeIFN-ω基因。缺少信号肽序列的FeIFN-ω1基因全长540bp，无内含子，编码180个氨基酸组成的成熟多肽；而FeIFN-ω2、FeIFN-ω3、FeIFN-ω4、FeIFN-ω5基因全长均为519bp，编码173个氨基酸组成的成熟多肽。所构建的表达质粒pET-His/FeIFN-ω(1-5)在OrigamiB(DE3)基因工程菌中能可溶地表达分子量约为21kDa的融合蛋白，与预测大小一致。SDS-PAGE检测和Western Blot分析显示纯化的重组蛋白为N末端含有6个组氨酸的融合蛋白，其纯度大于95％。抗VSV病毒活性试验的结果表明直接表达纯化获得的活性蛋白的比活均可达到10<7>IU/mg。且这五个亚型的猫干扰素ω蛋白的活性并不存在特别显著的差异。本研究的完成为生物工程发酵生产猫重组干扰素打下了坚实的基础。