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克氏原螯虾(Procambrusclarkii)作为一种新兴经济水产品近年来在中国大规模推广试养,这迫切要求我们掌握亲虾的营养需求以促进亲虾及幼体的质量。本研究对克氏原螯虾卵巢发育不同时期消化酶活力及组织生化成分进行了检测和分析,以探讨消化酶活力及生化组成在卵巢发育不同时期的变化规律,为掌握克氏原螯虾卵巢发育过程中消化生理、物质代谢及营养需求提供基础资料。
1卵巢发育时期肝胰腺消化酶活力的变化对克氏原螯虾卵巢发育不同时期肝胰腺中酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶等五种消化酶活力进行检测和分析,结果表明:(1)随着卵巢发育,脂肪酶活力没有明显变化(0.40-0.20U/mg蛋白),而其它四种酶都呈先增加后降低的变化趋势,意味着在卵巢发育过程中为满足卵巢对营养物质积累的需求,机体会对消化酶活力做相应的调节;(2)四种消化酶的变化规律存在差异,表现在达到最大消化酶活力时期不同步,其中酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力分别在Ⅲ(8.29U/mg蛋白)、Ⅱ(8.60U/mg蛋白)、Ⅲ(125.18U/mg蛋白)和Ⅱ(2.44U/mg蛋白)期达到最大。
2卵巢发育时期组织生化成分的变化采用微量凯氏定氮法、Folch抽提法以及3,5-二硝基水杨酸比色法对克氏原螫虾卵巢发育不同时期肝胰腺和卵巢组织中蛋白、脂肪和糖类等主要生化成分进行检测和分析,结果表明:(1)随着卵巢的发育,卵巢指数从0.12%显著上升到6.64%,而肝胰腺指数从7.95%显著下降至5.31%(P≤0.05),表明肝胰腺前期储存的营养物质在性腺发育过程中有转运到卵巢中的可能;(2)肝胰腺组织干重百分含量从Ⅲ(68.98%)到Ⅴ(47.31%)显著下降,干重中的脂肪含量在整个发育阶段未有显著变化,而蛋白以及总糖含量呈波浪式变化;(3)卵巢组织干物质百分含量在发育过程中呈显著增加趋势(22.29%-55.16%),干物质中脂肪含量在Ⅱ(32.38%)到Ⅲ(41.90%)期有一个显著的增加过程,但后期变化不明显,蛋白含量呈先降后升变化趋势,在Ⅲ期含量最小(50.45%),卵巢干物质中总糖含量较低,并随着卵巢的发育从6.51%显著下降至2.13%。
3卵巢发育过程中肝胰腺和卵巢脂肪酸组成利用气相色谱仪对克氏原螯虾卵巢发育不同时期肝胰腺和卵巢组织中脂肪酸组成进行检测和分析,结果表明:(1)肝胰腺和卵巢中主要脂肪酸中都有C16:0、C16:ln7、C18:0、C18:ln9、C18:ln7、C18:2n6和C18:3n3等,不同的是卵巢中的C20:4n6及C20:5n3含量也较高。在主要脂肪酸中,C16:0、C18:ln9和C18:2n6三种脂肪酸占绝大比例;(2)在卵巢发育过程中,卵巢中的三种高不饱和脂肪酸C20:4n6(6.76%-1.83%)、C20:5n3(7.24%-2.34%)及C22:6n3(1.05%-0.54)含量呈显著下降趋势,而C18:2n6(14.17%-22.61%)-直增加。意味着与海水虾蟹类相比,C18:2n6在克氏原螯虾胚胎发育过程中可能部分取代了高不饱和脂肪酸的作用。
4成熟卵巢及早期胚胎脂肪酸组成采用萃取方法将克氏原螯虾成熟卵巢和早期胚胎中脂肪分为中性脂和极性脂,分别对中性脂和极性脂脂肪酸组成进行检测和分析,结果表明:(1)成熟卵巢和早期胚胎中性脂和极性脂中的主要脂肪酸成分没有差别,都有C16:0、C16:ln7、C18:0、C18:ln9、C18:ln7、C18:2n6、C18:3n3、C20:4n6和C20:5n3等。(2)成熟卵巢极性脂中高不饱和脂肪酸相对含量(12.29%)较中性脂含量(4.98%)高,意味着高不饱和脂肪酸在卵巢发育过程中可能更倾向于储存在极性脂中;而早期胚胎中,中性脂和极性脂高不饱和脂肪酸的相对含量已没有明显差别;(3)从成熟卵巢到早期胚胎,相比于中性脂,极性脂中有更多的脂肪酸相对含量发生了显著变化,极性脂在早期胚胎发育过程中的代谢更加活跃,意味着其生理功能的重要性。
5卵巢发育过程中氨基酸组成利用氨基酸自动分析对克氏原螯虾卵巢发育不同时期卵巢组织中氨基酸组成进行检测和分析,结果表明:(1)成熟卵巢中必需氨基酸(EAA)含量最高为赖氨酸(4.47%),最小为蛋氨酸(1.49%),半必需氨基酸(SAA)含量最高为精氨酸(4.08%),非必需氨基酸(NEAA)中含量最高为谷氨酸(7.17%),最小为甘氨酸(1.98%);(2)必需氨基酸和半必需氨基酸中除苏氨酸和缬氨酸外各氨基酸含量都随卵巢发育呈显著增加趋势,但各氨基酸的增幅与相对含量没有明显关系;(3)非必需氨基酸中各氨基酸的增幅不明显,意味着非必需氨基酸的积累较必需氨基酸的积累不是非常重要,可以通过糖类或者脂类物质异生而成。