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我国具有丰富的兰科植物资源,其部分种类高雅幽香,具有极高的观赏价值和经济价值,一些品种还具有珍贵的药用价值。秦岭野生兰花资源是处于我国南北分界线上的一个野生资源分布群体。随着兰花市场的发展,开发和培育野生兰花资源对丰富和保存兰花资源就显得尤为重要,而组织培养、分子标记等生物技术也被广泛应用到野生兰花的保育、鉴定和育种研究中。本研究利用组织培养技术对影响两种秦岭野生兰花组织培养的各种因素进行研究,完善野生兰花组织培养体系;利用RAPD分子标记技术,对秦岭不同自然分布区的95份野生兰花材料进行了遗传多样性分析。试验主要结果如下:1.兰花组织培养中影响外植体培养因素的研究以秦岭野生春兰、野生蕙兰为试验材料,通过对基本培养基、生长调节剂NAA、2.4-D、6-BA、TDZ等因素的组合试验得出:基本培养基MS和1/2MS都能促进野生兰花外植体的生长,但MS培养基更有利于野生蕙兰的外植体生长,而1/2MS培养基更有利于促进野生春兰的外植体生长。NAA与6-BA在兰花外植体培养初期分别优于2.4-D和TDZ。NAA和6-BA的浓度组合维持在一个相对稳定的比例范围内且较低的生长调节剂用量有利于外植体生长。2.野生兰花组织培养过程褐化控制研究在试验中用聚乙烯吡咯酮（PVP）、柠檬酸、活性炭（AC）三种防褐剂及暗培养时间四种因素研究其对控制和减轻春兰外植体褐化的效果。结果显示,控制野生兰花外植体褐化的最佳的方案为:1/2MS+活性炭（AC）1 g/L+PVP 5 g/L+暗培养10d。3.优化和建立秦岭野生兰属RAPD-PCR反应体系通过RAPD-PCR体系优化试验。建立的反应体系为:Mg2+浓度为1.5～2.5u mol/L,dNTPs为0.16 mmol/L,模板DNA为100ng/25uL,引物浓度0.6 umol/L,Taq DNA聚合酶2U。程序为:94℃预变性3min,94℃变性1 min,37℃退火40s,72℃延伸90 s,40个循环;72℃延伸7 min。各因素对RAPD反应的影响大小顺序为:模板DNA >引物>Taq酶>dNTPs>Mg2+。4.秦岭野生兰属植物遗传多样性的RAPD分析为了进行RAPD分析,用筛选出多态性好的16个引物对95份样品进行PCR扩增,共扩增出了145条带,多态位点比率为100%。经聚类分析表明:样品之间的遗传多样性丰富,亲缘关系远近与地理距离、生态环境和植物种类表现出了很大相关性,但也不完全受制于地域位置的限制。