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目的:分离SGC-7901胃癌细胞株中含有CD44+的细胞,鉴定分离出的CD44+细胞是否为胃癌干细胞,并探讨胃癌干细胞与胃癌发生、转移、复发间的关系。方法:取购买的SGC-7901胃癌细胞株进行复苏培养,待扩增至一定量后通过流式细胞仪分选出含有CD44+细胞的实验组与不含有CD44+细胞的对照组,分别编号备用。将两组细胞连续培养1月,在第1、3、5、7、9、15天用MTT比色法测定各种细胞的增殖状态,以吸光度和生长天数分别为纵轴和横轴绘制生长曲线,并且通过曲线来对比这2组细胞的增殖速度。运用t检验方法对两组细胞的增殖能力进行分析。将上述分选的CD44+细胞计数,分别选取细胞数为1×102、1×103、1×104三组,每组3瓶细胞,将其编号为A、B、C三组。将购买的NOD/SCID小鼠随机分为3组,每组3只小鼠,将其编号为a、b、c三组,分别将上述A、B、C三组细胞注入相对应的三组NOD/SCID小鼠皮下,连续饲养8周,观察小鼠皮下是否出现肿瘤形态,比较三组小鼠皮下瘤体的生长情况与出现肿瘤的时间,对所得的结果运用秩和检验比较成瘤结果;将成瘤小鼠处死切下皮下瘤体做病理切片,比较此切片与胃癌的病理切片有何异同。结果:实验组含有CD44+细胞生长较对照组未含有CD44+细胞生长显著;实验组与对照组比较差异具有统计学意义(t=2.920,P<0.05);注射入NOD/SCID小鼠皮下的细胞中1x104组成瘤率明显高于其他两组,注射入NOD/SCID小鼠皮下的细胞中1×103组成瘤时间明显早于其他两组,差异具有统计学意义(t=2.353,P<0.05)。结论:运用流式细胞仪分选出的含有CD44+的细胞在胃癌肿瘤细胞总体中所占的比例5%,相对较低;CD44+细胞在体外培养条件下能生长成肿瘤球,并能进行连续传代;应用MTT比色法检测CD44+细胞活力,分选出的CD44+细胞在5-7天体外扩增条件下生长最为显著;CD44+细胞在适当细胞数量的情况下具有高致瘤性,且细胞的浓度与其致瘤性呈正相关;胃癌中含有CD44+细胞具有肿瘤干细胞的某些特性,并能在体外分离培养,具有自我更新能力和致瘤性,被认为是胃癌干细胞。CD44+是胃癌干细胞表面标志物之一,可以被作为鉴定胃癌干细胞的一种分子标志物。