环境胁迫和激素对番茄病程相关蛋白基因表达的影响

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农作物栽培过程中,常常遇到各种生物胁迫因子(病虫害等)和非生物胁迫因子(干旱、盐渍、冷冻、高低温、营养贫瘠、重金属胁迫、水灾、紫外线等),它们是造成农作物减产的主要原因。环境胁迫已成为我国农业生产所面临的严峻问题,严重地制约了我国农业的发展。 研究表明不只是病原体(如真菌、细菌、病毒),其它一些环境胁迫,例如紫外线、伤害、干旱、温度、化学物质等以及激素也能诱导植物产生系统获得性抗性(systemic acquired resistance,SAR)防卫反应。植物细胞在SAR反应过程中会出现一些生化变化,其中包括一类称为病程相关蛋白(pathogenesis-relatedproteins,PRP)的合成。按在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率大小,人们依次命名PR蛋白,包括PR-1,PR-2,PR-3,PR-4,PR-5五大类。另外,大量的实验结果表明,乙烯作为一种重要的植物激素,参与了植物胁迫反应,能诱导多种植物病程相关蛋白的表达。 目前烟草的许多PR蛋白基因已经被克隆,并且它们的生化特性也研究得比较清楚,同时伤害,病虫害以及激素对其表达影响也有报道。然而,环境胁迫和激素对番茄中的病程相关蛋白基因表达影响的研究却很少。 本文对普通番茄(Wild-type,WT),番茄乙烯生成和果实成熟均受到抑制的番茄突变体(ripening inhibitor,rin),乙烯不敏感型突变体(Never-ripening,Nr)以及1-氨基环丙烷羧酸(ACC)氧化酶Ⅰ协同抑制(co-suppression)的转基因番茄T4B-11进行了一系列胁迫条件处理,并且收集样品提取总RNA,通过PCR或RT-PCR克隆番茄中几个病程相关蛋白PR-1,PR-5,PR-NP24的基因片段作为探针来进行Northern杂交实验,在mRNA水平上研究了这些基因的表达模式。结果表明:干旱抑制了它们的表达,伤害、淹水等环境胁迫和激素均能不同程度地诱导它们的表达,而在不同温度下,它们的表达变化不大。
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