南极海单胞菌BSw10005的活性物质研究及其培养工艺优化

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来自南极海水的海单胞菌BSw10005,具有广谱抑菌作用,有较大的应用潜力。本文对该菌株发酵液进行冷冻干燥、乙醚萃取获得白色固体活性组分,经官能团显色、薄层层析研究,初步判定为胺类物质。通过对活性物质特性的研究,发现该活性成分可以耐受30℃~100℃,具有良好的热稳定性;在强酸条件下具有较好的稳定性,但在碱性条件下易失去活性。研究发现采用大孔吸附树脂对发酵液直接进行吸附洗脱的方法是可行的,这将简化分离纯化的操作步骤,对规模生产中节省成本和缩短操作周期都具有很好的指导作用。 通过摇瓶试验对培养基中的氮源和碳源进行了优化,得到了有利于提高发酵液中活性物质含量的新培养基:蛋白胨1﹪、硫酸铵0.3﹪、氯化钠0.5﹪。采用新培养基在摇瓶中进行BSw10005培养,发酵液中活性物质的含量为基础培养基的17.37倍,将活性物质的含量用土霉素来标定,相当于由原来的12.72ppm提高到了726.14ppm。采用新培养基在5L生物反应器中进行BSw10005培养,发酵液中活性物质含量为优化前的14.69倍。再通过调整培养条件,在低溶氧条件下进行培养,发酵液中活性物质含量又有所提高,为优化前的18.53倍。本研究结果为今后规模制备活性物质以及活性物质进一步分离纯化奠定了必要的基础,一定程度上解决了海洋细菌BSw10005培养中活性物质含量低的瓶颈问题。
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