聚合物纳米粒是由高分子物质构成的固态胶体粒子,具有稳定的形态结构、表面效应、小尺寸效应及量子隧道效应,有些聚合物纳米粒还具有温度、p H、电场和磁场效应等特定功能。所以,近些年来得到广泛关注。通常肿瘤化疗药物都存在靶向性差、毒副作用大等缺点。一些化疗药物还由于溶解度小而影响其应用。将难溶性的化疗药物载入纳米粒中,不仅可增加药物的溶解度,而且可使药物靶向病变部位,减少对正常组织和细胞的毒副作用等,具有广泛的应用前景。本文选择具有优良生物相容性和生物降解性的PLGA为疏水链,PEI为亲水链,通过形成酰胺键,合成两亲性共聚物PEI-PLGA(PP),再用具有优良肝靶向性的甘草次酸对其进行修饰,制得具有肝靶向性的共聚物GA-PEI-PLGA(GPP)。考察GA、PEI、PLGA摩尔比对GPP形成纳米粒的影响,筛选优化确定三者的最佳摩尔比为1:1:1。并应用FT-IR、13C-NMR、1H-NMR对产物进行结构表征,确证成功合成GPP共聚物。以芘为探针,采用稳态荧光探针法测定GPP共聚物的临界胶束浓度(CMC)为21.72?g/m L。所形成的GPP纳米粒大小均匀,平均粒径为164.6 nm,zeta电位为45 m V。通过溶血试验对GPP纳米粒的血液相容性进行考察,以评价其安全性。结果表明,GPP纳米粒的血液相容性优于PP纳米粒,PP纳米粒的血液相容性优于PEI。选择姜黄素(Cur)为模型药物,采用薄膜水化法制备姜黄素/GA-PEI-PLGA(Cur/GPP)纳米粒,应用单因素实验及正交设计试验,考察水化温度、水化时间、投药量对纳米粒的包封率及载药量的影响,筛选最佳制备工艺。结果表明,水化温度对纳米粒的包封率和载药量的影响最大,其次是投药量,再次是水化时间。确定最佳制备工艺条件为:水化温度60℃、水化时间4 h、投药量7 mg。按此最佳制备工艺制得的包封率为85.4%,载药量为16.1%。透射电子显微镜观察可见Cur/GPP纳米粒呈球形,大小均一,分布均匀;激光粒度分析仪测得Cur/GPP纳米粒的平均粒径为330.3nm,zeta电位为39.2 m V。采用动态透析法考察Cur/GPP纳米粒的体外释药性能。结果表明,游离Cur快速释放,3 h的累积释放率已达到95.0%。Cur/GPP纳米粒在0~2 h有一定的突释现象,2~14 h的释放速率较快,14~86 h的释放较平缓。Cur/GPP纳米粒在2 h的累积释放率为35.4%,14 h的累积释放率为70.4%,86 h的累积释放率为87.0%,具有缓释特性。采用MTT实验考察GPP纳米粒的细胞毒性,Cur/GPP纳米粒的对Hep G2和BEL-7402细胞的生长抑制作用,并与姜黄素/PEI-PLGA(Cur/PP)纳米粒、游离Cur进行比较。结果表明,GPP纳米粒、PP纳米粒对Hep G2和BEL-7402细胞两种的生长均有抑制作用,随着纳米粒浓度升高、纳米粒与细胞共孵育的时间增大,其抑制作用增大,细胞毒性增大;GPP纳米粒对Hep G2和BEL-7402细胞两种的生长抑制作用均小于PP纳米粒,说明GPP纳米粒的细胞毒性小于PP纳米粒。共同孵育24、72 h后,GPP纳米粒对Hep G2细胞和BEL-7402细胞的抑制率总体上大于Cur/PP纳米粒,两者均大于游离Cur;共同孵育48 h后,浓度较低时Cur/PP纳米粒的抑制作用大于Cur/GPP纳米粒,浓度较高时Cur/GPP纳米粒的抑制作用大于Cur/PP纳米粒,且二者的抑制作用总体大于游离Cur。采用细胞摄取试验评价Cur/GPP纳米粒的体外靶向性,以激光共聚焦显微镜观察Hep G2对Cur/GPP纳米粒的摄取情况,并与Cur/PP纳米粒进行比较。结果表明,GA修饰可显著促进纳米粒摄取进入细胞内,Cur/GPP纳米粒比Cur/PP纳米粒更易被Hep G2细胞摄取,且有较多的纳米粒进入细胞核中。