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调节性T细胞(Tregs)是CD4+T细胞中的一个亚群，在维持机体自身免疫耐受和免疫稳态方面起着不可替代的作用。Treg细胞的缺失，数目的减少以及功能异常均会导致严重的自身免疫病，如IPEX综合征以及scurfy小鼠。Foxp3是对Treg细胞的发育以及发挥功能起着决定性作用的转录因子，其突变或缺失会导致Treg细胞功能缺陷，进而导致机体致死性自身免疫疾病。在发育成熟的Treg细胞中敲除Foxp3能导致Treg细胞表型和功能的丢失。Treg细胞中Foxp3表达量的降低也能削弱Treg细胞抑制性功能。所以持续正常表达Foxp3对Treg细胞表型和功能的维持至关重要。 Treg细胞是一群具有异质性的CD4+T细胞，从来源上分为在胸腺中发育的tTreg细胞和在外周由常规的T细胞(Tconv)诱导产生的pTreg细胞，它们在维持机体免疫平衡中起着互补的作用。尽管大量的实验证据表明Foxp3+的细胞在某些条件下可以下调Foxp3的表达，通过重编程转变成常规的效应性T细胞，但是胸腺中发育成熟的tTreg细胞能否下调Foxp3的表达还不清楚。本课题利用BAC转基因技术构建了tTreg细胞的追踪报告小鼠(Foxp3-ΔCNS1-Cre-2A-eqFP650-2A-Thy1.1X Rosa-loxp-stop-loxp-YFP小鼠，简称CNS1-YFP)，在该小鼠中可以用细胞表面Thy1.1的表达来指示细胞内Foxp3的表达。通过对该报告小鼠分析发现，在外周淋巴器官中仅有1％左右的成熟tTreg细胞丢失Foxp3表达，证明tTreg细胞在生理条件下非常稳定。但将这群相对稳定的tTreg细胞过继转移到淋巴细胞缺陷的小鼠，他们会大量丢失Thy1.1和Foxp3的表达。这些extTreg细胞在脾脏中转变成能分泌IFN-γ的Th1细胞，在皮氏结中转变成CXCR5+PD1+的滤泡辅助性T细胞。在tTreg细胞进一步分化发育成TFR和Th1-Treg细胞的过程中，也能观察到这种重编程的现象。通过转录谱分析发现Thy1.1+tTreg细胞高表达CD25，CCR7等分子，通过IL2/STAT5信号通路稳定Foxp3的表达;而extTreg的前体细胞Thy1.1-Treg细胞表达和Treg活化相关的分子，说明Treg细胞的活化和Foxp3的丢失密切相关。我们进一步证明在Treg细胞活化过程中IL2信号下调，ICOS信号上调是导致Foxp3不稳定和重编程的主要因素，IL2和ICOS信号控制tTreg细胞的稳定性和活化之间的平衡。最后，我们用双报告系统同时标记了T-bet和Foxp3，并分析了效应性Th1-Treg细胞的命运走向，证明效应性Treg细胞并不能稳定表达T-bet，丢失T-bet表达的Th1-Treg细胞转变成central Treg细胞(CD25+CCR7+CD62L+)并维持了Foxp3的稳定表达。 本文研究结果证实了胸腺中发育成熟的tTreg细胞在生理条件下是稳定的，活化既能促进tTreg细胞的进一步分化发育，也能导致Foxp3变得不稳定，为继续寻找维持Treg细胞稳定性的关键因素奠定了基础，可能为治疗自身免疫疾病提供新的策略。