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第一部分一氧化氮合酶抑制剂对大鼠耳蜗诱生型一氧化氮合酶mRNA表达的影响
目的:观察一氧化氮合酶抑制剂(N-nitro-argininemethylesterL-NAME)对新霉素(neomycin)诱导的诱生型一氧化氮合酶信使核糖核酸(induciblenitricoxidemRNA,iNOSmRNA)在耳蜗表达的影响。
方法:将50只SD大鼠分为三组,正常组10只(连续每天注射注射用水2ml,共14天,和实验组一同处死),新霉素组20只(连续每天肌肉注射新霉素150mg/kg,共14天),新霉素+L-NAME组20只(连续每天腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME50mg/kg,30分钟后肌肉注射新霉素同实验组,共14天),建立新霉素造成的耳毒性损伤的大鼠动物模型。应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(realtimereversetranscription-polymerasechainreaction,real-timeRT-PCR)技术检测各组耳蜗顶圈、中圈、底圈大鼠iNOSmRNA表达。
结果:新霉素组和新霉素+L-NAME组比较顶圈、中圈、底圈iNOS表达比率升高,差别有统计学意义(F=5.31,P=0.044,P＜0.05;F=79.60,P=0.001,P＜0.05;F=10.89,P=0.008,P＜0.05)。
结论:一氧化氮合酶抑制剂可以抑制耳蜗组织在病理过程中iNOSmRNA的高表达,从而减少NO的大量产生,有助于减轻氨基甙类抗生素等耳毒性药物导致的耳毒性损伤。
第二部分一氧化氮合酶抑制剂对大鼠耳蜗神经型一氧化氮合酶mRNA在表达的影响
目的:观察一氧化氮合酶抑制剂(N-nitro-argininemethylesterL-NAME)对新霉素(neomycin)诱导的神经型一氧化氮合酶信使核糖核酸(neuronalnitricoxidemRNA,nNOSmRNA)在耳蜗表达的影响。
方法:将50只SD大鼠分为三组,正常组10只(连续每天注射注射用水2ml,共14天,和实验组一同处死),新霉素组20只(连续每天肌肉注射新霉素150mg/kg,共14天),新霉素+L-NAME组20只(连续每天腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME50mg/kg,30分钟后肌肉注射新霉素同实验组,共14天),建立新霉素造成的耳毒性损伤的大鼠动物模型。应用实时荧光定量逆转录.聚合酶链反应(realtimereversetranscription-polymerasechainreaction,real-timeRT-PCR)技术检测各组耳蜗顶圈、中圈、底圈大鼠nNOSmRNA表达。
结果:新霉素组和新霉素+L-NAME组顶圈、中圈、底圈nNOSmRNA表达较正常组升高,但新霉素组和新霉素+L-NAME组nNOSmRNA表达差别无统计学意义(P＞0.05)。
结论:新霉素可以诱导耳蜗nNOS的表达增加,但是一氧化氮合酶抑制剂L-NAME在本试验中并没有显示出抑制nNOSmRNA表达的作用。
第三部分一氧化氮合酶抑制剂对大鼠耳蜗内皮型一氧化氮合酶mRNA表达的影响
目的:观察一氧化氮合酶抑制剂(N-nitro-argininemethylesterL-NAME)对新霉素(neomycin)诱导的内皮型一氧化氮合酶信使核糖核酸(endothelialnitricoxidemRNA,iNOSmRNA)在耳蜗表达的影响。
方法:将50只SD大鼠分为三组,正常组10只(连续每天注射注射用水2ml,共14天,和实验组一同处死),新霉素组20只(连续每天肌肉注射新霉素150mg/kg,共14天),新霉素+L-NAME组20只(连续每天腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME50mg/kg,30分钟后肌肉注射新霉素同实验组,共14天),建立新霉素造成的耳毒性损伤的大鼠动物模型。应用实时荧光定量逆转录.聚合酶链反应(realtimereversetranscription-polymerasechainreaction,real-timeRT-PCR)技术检测各组耳蜗顶圈、中圈、底圈大鼠eNOSmRNA表达。
结果:新霉素组和新霉素+L-NAME组项圈、中圈、底圈eNOSmRNA表达较正常组升高,但新霉素组和新霉素+L-NAME组eNOSmRNA表达差别无统计学意义(P＞0.05)。
结论:新霉素可以诱导耳蜗eNOS的表达增加,但是一氧化氮合酶抑制剂L-NAME在本试验中并没有显示出抑制eNOSmRNA表达的作用。