实时荧光定量PCR及免疫组化检测非小细胞肺癌中Survivin表达及意义

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目的建立实时荧光定量PCR检测Survivin mRNA的方法。检测Survivin蛋白和mRNA在肺癌组织及正常肺组织中的表达水平,探讨肺癌组织中Survivin的表达及临床意义。方法采用免疫组化技术和实时荧光定量PCR技术检测40例非小细胞肺癌组织和20例正常肺组织中Survivin蛋白和mRNA表达情况,同时分析Survivin表达情况和临床病理特征间的关系。SPSS13.0统计软件进行数据分析:免疫组化结果用X2检验或Fisher确切概率法检验;实时荧光定量PCR结果两个样本均数间比较采用t检验,多个样本均数间比较用方差分析;Kaplan-Meier法进行生存分析,生存曲线比较用Log-rank检验。结果1.免疫组化法结果:(1)Survivin在非小细胞肺癌中阳性率为67.5%高于正常肺组织中的5%(P=0.000),差异有统计学意义。(2) Survivin在非小细胞肺癌患者中阳性率:①男性患者为62.5%,女性患者为75%(P=0.408),差异无统计学意义。②年龄<60岁患者为65.4%,≥60患者为71.4%(P=0.972),差异无统计学意义;③鳞癌患者为66.7%,腺癌患者为68.8%,腺鳞癌66.7%(P=0.991),差异无统计学意义;④高分化患者为71.4%、中分化患者为50%,低分化患者为69%(P=0.739),差异无统计学意义;⑤肿瘤大小≤3cm患者为80%,>3cm患者为63.3%(P=0.599),差异无统计学意义;⑥有淋巴结转移患者为68%,无淋巴结转移为67.7%(P=0.931),差异无统计学意义;⑦临床为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者Survivin表达分别为75%、60%、66.7%(P=0.873),差异无统计学意义;⑧近期有复发患者为83.3%,近期无复发患者为64.7%(P=0.643),差异无统计学意义。(3)Survivin阳性组中位生存时间24个月,阴性组中位生存时间28个月(P=0.285),差异无统计学意义。2.荧光定量PCR结果:(1)Survivin mRNA在非小细胞肺癌中的表达为1.639±1.372,高于正常肺组织中的0.580±0.487 (P=0.000),差异有统计学意义。(2) Survivin mRNA在非小细胞肺癌患者中的表达:①男性患者表达1.605±1.521,女性患者为1.691±1.156(P=0.848),差异无统计学意义;②年龄<60岁患者表达1.501±1.154,≥60患者为1.897±1.725(P=0.390),差异无统计学意义;③鳞癌患者表达1.613±1.807,腺癌患者为1.829±1.132,腺鳞癌1.413±1.224(P=0.737),差异无统计学意义;④高分化患者表达1.120±0.730、中分化患者为1.450±0.472 ,低分化患者为1.765±1.554(P=0.616),差异无统计学意义;⑤肿瘤大小≤3cm患者表达1.732±1.559,>3cm患者为1.609±1.333(P=0.809),差异无统计学意义;⑥有淋巴结转移患者表达1.671±1.517,无淋巴结转移为1.587±1.137(P=0.855),差异无统计学意义;⑦临床为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者Survivin表达分别为1.609±1.214、1.747±1.584、1.600±1.423(P=0.962),差异无统计学意义;⑧近期有复发患者表达为2.056±1.948,近期无复发患者为1.566±1.270(P=0.427),差异无统计学意义。(3)Survivin mRNA高表达组中位生存时间22.5个月,低表达组中位生存时间24个月(P=0.325),差异无统计学意义。结论初步建立的实时荧光定量PCR方法可以成功检测非小细胞肺癌中Survivin mRNA的表达量。两种检测方法都显示Survivin在非小细胞肺癌组织中的表达显著高于正常肺组织中的表达,表明Survivin可能对肺癌的发生起重要作用,而Survivin对肺癌预后判断是否有价值有待进一步研究。
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