SP17、SPAG9、OY-TES-1基因在卵巢上皮性癌中的实时定量PCR表达及甲基化情况的研究

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目的检测SP17、SPAG9、OY-TES-1这三种癌-睾丸抗原基因在卵巢上皮性癌与非卵巢癌中的q Realtime-PCR扩增基因表达及这三种基因在启动子区域的甲基化情况,探讨其与卵巢上皮性癌的关系。方法收集2015年1月至2016年4月于内蒙古自治区人民医院行卵巢手术患者的新鲜卵巢组织共60例,其中有30例新鲜的卵巢上皮性癌组织标本,及30例新鲜的非卵巢癌组织标本。q Realtime-PCR实验:从卵巢组织中提取RNA,反转录为c DNA,运用SYBR实时荧光定量PCR技术对上皮性卵巢癌及非卵巢癌中的特定RNA序列进行定量分析。甲基化实验:提取卵巢组织的DNA,运用DNA酸性亚硫酸盐转化、PCR扩增及PCR测序方法检测SP17、SPAG9、OY-TES-1在卵巢上皮性癌与非卵巢癌中Cp G岛的甲基化差异性表达情况。q Realtime-PCR实验数据应用2-△△CT进行处理后,应用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析,采用两独立样本t检验分析,P<0.001有显著性差异,具有统计学意义。检测甲基化情况所得数据用SPSS 19.0进行卡方检验或Fisher确切概率法进行检验,P<0.05有统计学意义。结果1.60例实验标本中,最终上皮性卵巢癌及非卵巢癌组织标本中各有25例结果在有效分析范围内;2.SP17基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表达高于其在非卵巢癌中的表达,差异有统计学意义(t=16.913,P<0.001);SPAG9基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表达高于其在非卵巢癌中的表达,差异有统计学意义(t=14.312,P<0.001);OY-TES-1基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表达高于其在非卵巢癌中的表达,差异有统计学意义(t=15.976,P<0.001);3.在25例上皮性卵巢癌中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区去甲基化发生率分别为:56%(14/25)、52%(13/25)、44%(11/25);在25例非卵巢癌中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区去甲基化发生率分别为:12%(3/25)、16%(4/25)、8%(2/25);这三种基因的去甲基化表达情况在上皮性卵巢癌与非卵巢癌中相比差异有统计学意义(P<0.05);4.SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区去甲基化表达与上皮性卵巢癌患者的年龄、组织类型及分化程度无关(P>0.05);SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区去甲基化表达与上皮性卵巢癌患者的淋巴结转移有关(P<0.05);SP17、SPAG 9基因启动子区域去甲基化表达与上皮性卵巢癌患者的临床分期有关(P<0.05),而OY-TES-1基因启动子区域去甲基化表达与其临床分期无关(P>0.05)。结论1.SP17、SPAG9、OY-TES-1基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表达高于其在非卵巢癌中的表达,联合检测SP17、SPAG9、OY-TES-1基因在上皮性卵巢癌患者中的RNA表达水平,可以提高上皮性卵巢癌诊断地灵敏性,有望成为诊断上皮性卵巢癌有效生物学标志物。2.在上皮性卵巢癌患者中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区去甲基化表达率高于其在非卵巢癌患者中的表达;SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区在上皮性卵巢癌中激活,可能参与癌症的发生、发展及转归;3.SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区去甲基化表达与上皮性卵巢癌患者的淋巴结转移有关;SP17、SPAG9基因启动子区域去甲基化表达与临床分期有关,而OY-TES-1基因启动子区域去甲基化表达与临床分期无关;但这三种癌睾丸抗原均与上皮性卵巢癌患者的年龄、组织类型及分化程度均无关,说明这三种癌睾丸抗原在预测上皮性卵巢癌的预后及评定上皮性卵巢癌的临床分期中有一定的作用。
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