罗伊氏乳杆菌于2003年被国家卫生部批准可作为人类保健品的微生物菌种,也是国际上公认的新型益生乳酸菌,已广泛应用于食品发酵行业,但目前的研究主要集中于罗伊氏乳杆菌对人类益生效果,对于罗伊氏乳杆菌调节肠道功能和治疗肠道疾病的作用未有足够的研究与关注。因此,本试验对罗伊氏乳杆菌GL005进行真空冷冻干燥进行工艺优化,并进一步应用于产肠毒素大肠埃希氏菌致兔腹泻疾病模型,探究其治疗效果,为罗伊氏乳杆菌在兽医临床应用中提供理论基础与数据支持。本实验研究内容主要分为四个方面:（1）对罗伊氏乳杆菌GL005进行真空冷冻干燥研究,对保护剂、填充剂、抗氧化剂、酸碱调整剂进行单因素试验和正交试验设计,优化复合保护剂。（2）对罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉进行模拟胃肠道耐受性试验,测定活菌数。（3）对罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉的贮藏稳定性进行研究,在25℃、4℃、-20℃、-80℃环境下每月检测一次活菌数。（4）基于家兔大肠杆菌腹泻疾病模型应用罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉,研究罗伊氏乳杆菌GL005对于产肠毒素大肠埃希氏菌所致兔腹泻疾病的治疗效果。试验结果表明:（1）单因素试验筛选得到保护剂、填充剂、抗氧化剂、酸碱调整剂为:海藻糖、山梨醇、硫代硫酸钠、甘氨酸,然后进行正交试验对复合保护剂进行优化,得到罗伊氏乳杆菌GL005保护剂的最佳配方为10%海藻糖、4%山梨醇、0.6%甘氨酸、4%硫代硫酸钠,冻干后存活率在79.61%～88.21%。与相关报道相比,本研究提高了菌体冻干存活率,降低了保护剂成本。（2）罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉在模拟胃液中3 h存活率为87.9%,在模拟肠液中4 h存活率为89.43%,对比罗伊氏乳杆菌菌液均有不同程度提升,罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉对于胃肠液具有较强的耐受性,与相关报道相比,罗伊氏乳杆菌GL005株冻干菌粉胃肠道耐受性较强,具有开发可行性。（3）通过在25℃、4℃、-20℃、-80℃不同条件下进行探究,得出结论在-80℃条件下稳定性最好,四个月存活率达79.52%。（4）罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉对于产肠毒素大肠埃希氏菌所致兔腹泻疾病具有一定的治疗效果,能够显著降低炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-12、IL-1β,促凋亡因子caspase-3与caspase-9以及血清DAO和D-乳酸含量,修复肠黏膜损伤,使用1 g/kg罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉能够替代0.04 g/kg诺氟沙星治疗大肠埃希氏菌所致的兔腹泻疾病。罗伊氏乳杆菌GL005具有潜在优良的益生菌的特性,冻干后对胃肠液的耐受性有所提升,对兔腹泻疾病有较好的保健作用。本试验为罗伊氏乳杆菌GL005冻干菌粉投入生产应用提供了技术与理论支持。