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背景与目的食管癌是食管鳞状上皮的恶性肿瘤,中国是世界上食管癌的高发国家,也是食管癌死亡率最高的国家之一,年平均死亡率为14.59/10万,严重危害人民的生命健康。食管癌的发生、发展是一个多因素、多阶段、多基因变异的复杂生物学过程,它的生长分为无血管的缓慢生长阶段和有血管的快速增殖阶段,无血管期内肿瘤细胞的生长主要依靠细胞周围的营养物质和氧气生存。如果没有血管生成,原发肿瘤的生长不会超过1-2mm3。随着瘤体的增大,肿瘤本身或宿主组织将建立新生血管网以供给瘤体营养。淋巴管系统则是食管癌转移的重要途径,淋巴转移对食管癌临床治疗的选择和判断预后具有重要意义,但由于长期缺乏适当的淋巴管内皮特异性标记和对淋巴管生成因子的认识,人们将研究重点集中于微血管与肿瘤增殖、转移的关系上,对于肿瘤内部淋巴管存在与否及其与肿瘤转移的关系存在争议。随着淋巴管内皮细胞分子标记物相继被发现,研究表明肿瘤组织中淋巴管生成明显增加,并与肿瘤的浸润、淋巴转移等密切相关,但淋巴管生成的原因、过程及分子机制尚不清楚。D2-40是新近发现的一种淋巴管内皮细胞特异性标记物,可用来标识胃癌、直肠癌等多种肿瘤的新生淋巴管,但在食管癌中应用D2-40标记微淋巴管的相关研究却很少见。环氧化酶(cyclooxygenase, COX)是前列腺素(prostaglandin, PG)合成的限速酶,可将花生四烯酸(arachidonic acid, AA)催化合成各种前列腺素产物,从而维持机体的各种生理病理过程。COX有两种同工酶,COX-1和COX-2,COX-1在大多数组织中呈持续表达,维持胃黏膜的完整性、调节血小板功能和肾血流量等,属结构型表达蛋白。COX-2不同于COX-1,被认为是“快速反应基因”,在细胞受到各种刺激后迅速合成,参与多种病理、生理过程。多项研究证明COX-2可通过促进微血管及微淋巴管的生成参与食管癌的发生与发展。本实验为进一步探讨在食管癌中COX-2的表达与微血管密度(microvascular density, MVD)和微淋巴管密度(microlymphaticvessel density, MLD)的关系及与食管癌患者临床、病理特征的关系,应用免疫组化技术检测食管癌组织中COX-2、微血管、微淋巴管的表达情况,从而可能为食管癌患者的治疗提供新的靶点。材料与方法(1)收集汕头大学医学院附属第二医院2005年3月-2008年7月临床资料完整的术前未进行化疗或放疗的手术切除食管癌石蜡标本105例。另取正常食管黏膜组织10例,取自同期食管癌手术切除标本中,距癌组织5 cm以外,常规病理证实为正常组织的标本作对照组。105例标本中男76例,女29例；年龄37-75岁,平均年龄57.76岁；鳞癌99例,腺癌6例。根据UICC2002年的修订标准行TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期68例,Ⅲ+Ⅳ期37例；淋巴结转移阳性者47例,阴性者58例；高分化26例,中分化35例,低分化44例。石蜡标本经5μm厚度连续切片,对照组10例,免疫组化染色。(2)应用免疫组化技术检测食管癌组织中COX-2、微血管密度和微淋巴管密度的表达情况,分析其在食管癌组织中表达的变化与临床、病理特征的关系。探讨COX-2表达与肿瘤微血管和微淋巴管生成的关系。(3)实验数据应用SPSS 15.0统计学软件进行统计分析。采用均数±标准差(x±s)对连续数据进行描述,COX-2、微血管密度和微淋巴管密度的表达与临床病理参数间的关系用χ2检验,MVD、MLD在COX-2不同表达水平的差异采用t检验。以P<0.05为差异有统计学意义,以P<0.01为差异有高度统计学意义。结果(1)105例食管癌中,COX-2阳性表达率为96.19%(101/105),高表达率为74.3%(78/105),阳性表达信号主要位于肿瘤细胞的胞质中。COX-2的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤部位、肿瘤类型和临床分期等临床病理参数无关(P>0.05)。(2)全组病人的平均MVD和MLD值分别为52.41±22.557、94.44±37.638,COX-2高表达组的MVD和MLD值分别为59.03±21.816、99.36±38.818,COX-2低表达及阴性组的MVD和MLD值分别为33.30±10.730、80.22±30.356。78例COX-2高表达组的平均微血管密度和平均淋巴管密度明显高于27例低表达及阴性组,两者间差异有统计学意义(P<0.01和P<0.05)。(3)MVD的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤部位、肿瘤类型和临床分期等临床病理参数无关(P>0.05)。MLD的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05),与其他临床病理参数无关(P>0.05)。结论COX-2在食管癌病人的广泛表达对肿瘤微血管及微淋巴管的形成起重要作用,检测COX-2的表达对了解肿瘤微血管及微淋巴管形成的机制有一定的作用,可能为食管癌病人的治疗提供新的靶点。D2-40标记淋巴管的特异性和敏感性较好,显示食管癌组织中存在大量淋巴管生成,且MLD的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关。