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IGF2基因、GRB10基因是哺乳动物的印记基因,该研究通过检测等位基因表达考察鸡的IGF2基因、GRB10基因的印记状况.类胰岛素生长因子-Ⅱ(IGF2)是一种促有丝分裂多肽类激素.利用PCR-SSCP方法在一个乌鸡家系父母代对IGF-Ⅱ基因多态性进行检测.在该基因外显子1、外显子2中发现多态位点,这两个位点呈连锁遗传.测序结果显示外显子1的第72(自第一密码子开始)位碱基有C/G突变.分别选取1日龄、90日龄杂合子×纯合子后代与纯合子×杂合子后代,检测IGF2在这两位点的基因型.对于确定为杂合子的后代,重新设计一对包含突变位点、并跨内含子2的引物,取同日龄纯合子个体作对照,利用RT-PCR-SSCP检测1日龄乌鸡肝脏,90日龄乌鸡肝脏、肌肉、心脏、肾脏组织中等位基因表达状况.结果显示,鸡的IGF2基因两个等位基因均等表达,表明鸡的IGF2基因不受印记控制.GRB10基因在体内与胰岛素受体、类胰岛素1型受体结合,抑制相应激素与受体的结合.尽管哺乳类GRB10蛋白研究很多,但是目前,鸡的GRB10基因尚无报道.该研究通过对cDNA文库中一个包含GRB10基因的克隆测序,得到鸡的GRB10基因的3′端序列.利用5′RACE方法,克隆得到了鸡的GRB10基因的全部编码区序列、3′非翻译区与部分5′非翻译区.GRB10基因的编码区包含1791bp的DNA序列,鸡与人和小鼠核苷酸序列同源性分别为78％和66％.外显子结构上,鸡与小鼠的编码区结构相似:在第4、5外显子之间含一个75bp的可变剪接(编码25个氨基酸残基),而且,较长的剪接体不是常见的存在形式.鸡的GRB10基因编码596个氨基酸的多肽,与人GRG10蛋白的氨基酸同源性为81％,鸡与小鼠氨基酸同源性为64％.利用直接测序方法对鸡GRB10基因的cDNA在6只明星鸡与6只丝乌骨鸡进行多态性分析,结果显示,在cDNA多态性分析共发现4个SNP位点,在编码区273bp、421bp、848bp三个位点,发现都存在A/G突变;在编码区966bp,发现CT/突变,这些突变共同的特点是都位于密码子第三位,由于密码子的简并性,这些SNP都没有引起编码的氨基酸的改变,属于同义突变.GRB10基因是哺乳动物的一种印记基因.鸡GRB10基因cDNA的测序分析显示,在多个位点与个体中,测序结果表现为位点杂合,这表明两个等位基因同时表达,鸡的GRB10基因与它在哺乳类同源基因不同,不受印记控制.