目的:应用辛开苦降法代表方剂喂养大鼠提取含药血清,以脂多糖(LPS)损伤Caco-2细胞的方式模拟溃疡性结肠炎(UC)模型。通过细胞活力,免疫荧光、Western blot等方法检测蛋白表达,探索辛开苦降法治疗溃疡性结肠炎细胞的作用机制。方法:以Caco-2细胞作为研究对象,采用脂多糖(LPS)制作细胞炎症模型。将20只WB大鼠分为:空白组、西药对照组(即柳氮磺吡啶组)、乌梅丸方药组、半夏泻心汤方药组、甘草泻心汤方药组。正常组给予饮水、进食,不给予任何药物、其余组给予柳氮磺吡啶、乌梅丸方药、半夏泻心汤方药、甘草泻心汤方药,连续给药7天。禁食禁水,提取血清。Caco-2细胞用脂多糖造模,用CCK-8检测细胞活力,选择最佳时间、最佳脂多糖(LPS)浓度后,同时给予含药血清,细胞分组为正常组、模型组、西药对照组(柳氮磺吡啶)、乌梅丸方药组、半夏泻心汤方药组、甘草泻心汤方药组。(1)用CCK-8检测细胞活力;(2)用免疫荧光法检测细胞TLR4/NF-κBp65蛋白的表达。(3)用Western blot法检测细胞中TLR4/NF-κBp65/IKB蛋白表达高低。结果:(1)细胞活力:相较于正常组,模型组细胞活力损伤降低(p<0.01),相较于模型组,辛开苦降法代表方剂和对照组(柳氮磺吡啶)细胞活力提高。正常组细胞活力为值100%,模型组通过脂多糖(LPS)损伤后细胞活力值下降到77%,对照组细胞活力值为88%,乌梅丸组细胞活力值为85%,半夏泻心汤组细胞活力值为92%,甘草泻心汤细胞活力值为76%。差异有统计学意义(p<0.05)。(2)TLR4/NF-κBp65/IKB蛋白表达:与正常组比较,模型组TLR4/NF-κBp65/IKB蛋白呈现高表达(p<0.01)。与模型细胞组比较,辛开苦降法代表方药组和对照组(柳氮磺吡啶)TLR4/NF-κBp65/IKB蛋白表达降低,差异有统计学意义(p<0.05)。(3)免疫荧光TLR4/p65蛋白表达:与正常组相比,模型组TLR4蛋白表达显著增高,NF-κBp65蛋白表达增高。