【摘 要】
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本研究通过体内实验和体外培养两种方式探讨高浓度黄曲霉毒素B1(AFB1)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺细胞和DNA的损伤机制。 主要研究方法与具体结果如下: 1
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本研究通过体内实验和体外培养两种方式探讨高浓度黄曲霉毒素B1(AFB1)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺细胞和DNA的损伤机制。 主要研究方法与具体结果如下: 1、体内实验采用两种饲料(对照组饲料和含2000μg/kgAFB1的实验组饲料)饲喂体质量为(0.3±0.02)g F1代凡纳滨对虾4周。每4d进行一次肝胰腺抗氧化酶的测定。结果显示,实验组第8 d SOD活力显著低于对照组。在连续饲喂两周后SOD活力显著降低,同时实验组SOD活力极显著低于对照组。CAT活力在每个阶段均显著下降,20 d后虽然有上升趋势,但活力明显低于初始值,8d后,实验组CAT活力均低于对照组,尤其是第8、16和24 d酶活力极显著低于对照组。GSH-Px活力整体均低于对照组,且机体自我修复能力下降。MDA含量在16d之后显著增加,同时实验组MDA含量极显著高于对照组,且呈现上升的趋势。这些结果表明,高浓度AFB1对凡纳滨对虾抗氧化酶的损伤因酶种类而异,同时对肝胰腺的损伤持续增加,在4周内便会造成肝胰腺的严重损伤。同时,养殖结束后,通过单细胞凝胶电泳实验(SCGE)对肝胰腺细胞DNA损伤进行检测,实验结果表明高浓度黄曲霉毒素B1对肝胰腺细胞DNA存在显著的损伤作用。 2、将体外培养的培养液中AFB1的终浓度设置为0,400,800,1200,1600μg/L,对原代培养的肝胰腺细胞处理1h后进行部分抗氧化酶的测定。实验结果发现SOD酶活力随浓度升高呈现先增加后减少的趋势,肝胰腺细胞的T-AOC随AFB1浓度的增加而下降。GSH-Px酶活力受AFB1浓度影响较大,400μg/L的浓度便会造成酶活力的显著下降。肝胰腺细胞内MDA含量有明显的增加。结果表明AFB1能在体外条件下损伤肝胰腺细胞的抗氧化系统。 3、将体外培养的培养液中AFB1的终浓度设置为2000μg/L,将染毒时间设为0.5,1,1.5,2,2.5 h,分别进行抗氧化酶的测定。实验结果显示实验组SOD酶活力随时间出现先短暂升高后降低的趋势,CAT酶和GSH-Px酶活力逐渐降低,而MDA含量显著升高。体外实验结果表明黄曲霉毒素B1能在体外条件下损伤肝胰腺细胞的抗氧化系统,这种损伤随时间推移而增强,造成细胞部分抗氧化酶活力受到抑制,脂质过氧化程度随AFB1浓度与作用时间的增加更加严重。氧化力与抗氧化力不平衡可能是黄曲霉毒素B1对细胞发挥毒性的作用机制。
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