不同保护剂下冻存脂肪颗粒组织的活力影响

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背景:自体脂肪移植是一种理想的软组织缺损填充材料,几乎可用于全身各个部位的软组织缺损填充。尽管为了提高成活率和减少吸收率,国内外的研究人员进行了大量的研究,但目前移植后脂肪组织体积最终只能保持在移植时的50%左右。因此,临床上仍需要通过少量、反复、多次移植提高脂肪移植成活率,以达到患者满意的填充效果。但多次脂肪注射除增加了医生的工作量外,对患者造成多次抽脂的痛苦、较高的风险及费用。如果能实现一次抽取足够的脂肪体外长期冷冻储存,需要时复温培养后注射移植,则具有重要的临床应用价值。目前关于颗粒脂肪组织低温保护剂选择的研究很少,冻存细胞时常用的基础培养基及血清(或血清替代物)等是否有利于保持冷冻贮存脂肪组织的活力、提高移植成活率的研究还未见报道。目的:基于上述疑问,本研究设计以单纯生理盐水(PS)冻存脂肪颗粒为对照组,以生理盐水加8%二甲基亚砜(DMSO)及胎牛血清加8%DMSO冻存脂肪颗粒组织为实验组,对脂肪颗粒细胞的细胞活性、周期分布等进行比较研究。以期望能够通过对不同冻存保护剂下脂肪颗粒组织增殖能力、细胞活性等的比较研究找到适合的脂肪颗粒组织体外冷冻储存的保存液配方,为临床上实现“一次冻存,多次移植”,降低患者的痛苦和医疗费用,减少医生的工作量,提高脂肪移植的成活率和临床满意度提供夯实的理论支持和实验依据。方法:将混有不同冻存液的脂肪颗粒组织放置-196℃液氮中冻存,于冻存后2个月取出脂肪颗粒组织,复温后通过肌酸激酶法、台盼蓝染色、MTT细胞增殖实验等方法,比较脂肪细胞的存活率、酶活性及增殖能力等情况。结果:胎牛血清加8%DMSO冻存脂肪组织组其复温后的细胞活性、存活能力明显高于单纯以生理盐水冻存组及生理盐水加8%DMSO冻存组。结论:与文献报道一致的是,一定浓度玻璃化冷冻保存剂DMSO的应用有助于明显提高冻存脂肪颗粒组织的活力和移植后存活率。以胎牛血清取代生理盐水作为冻存基础液能进一步提高冻存脂肪颗粒组织的活力和移植后的成活率。
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