健脾补肾方对Lewis肺癌荷瘤小鼠Fas、FasL基因表达影响的实验研究

来源 :陕西中医学院 陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingmiannv
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目的:通过 Lewis肺癌移植瘤小鼠模型的建立,观察健脾补肾方对肺癌荷瘤小鼠一般情况、抑瘤率、脏器指数,并采用免疫组织化学方法检测肺癌组织中Fas和FasL的表达,从而揭示健脾补肾方抗肿瘤的作用及其机理,为其在临床上的进一步应用提供科学的实验依据。  方法:从70只C57BL/6雄性小鼠中随机抽取10只进行造模预实验,再随机抽取12只作为预空白对照组。在造模与试验成功后将剩余小鼠共同造膜,造模成功后第5天从造模成功的小鼠中选取肿瘤长势良好的40只,随机分为4组,从预空白对照组选取一般状况良好的10只作为空白对照组。这5组分别为:A组:空白对照组;B组:荷瘤对照组;C组:中药组(健脾补肾方);D组:化疗组(顺铂);E组:中药+化疗组(健脾补肾方+顺铂)。各组小鼠分别给予相应实验药物干预,各组连续给药14天。A组:隔天给予腹腔注射生理盐水0.2ml,共3次,同时予生理盐水0.2ml灌胃,每天1次;B组:隔天腹腔注射生理盐水0.2ml,共3次,同时予灌胃生理盐水0.2ml,每天1次;C组:隔天腹腔注射生理盐水0.2ml,共3次,同时予灌胃中药煎剂0.2ml,每天1次;D组:隔天腹腔注射顺铂溶液0.2ml,共3次,同时灌胃生理盐水0.2ml,每天1次;E组:隔天腹腔注射备好顺铂溶液0.2ml,共3次,同时灌胃中药煎剂0.2ml,每天1次。每日对小鼠进行称重、观察小鼠机体一般情况、瘤体大小、以及死亡等情况并做详细记录,在药物干预第15天将各组小鼠进行脱颈处死,剥离瘤组织,观察并称重,对脾脏、胸腺进行称重,计算抑瘤率、免疫器官(胸腺、脾脏)指数,同时按组别分别用中性福尔马林固定瘤体,常规HE染色观察细胞形态,用免疫组化法检测移植瘤小鼠肺癌组织中Fas和FasL的表达情况,并用统计学方法计算阳性率。  结果:1、顺铂组、健脾补肾方组、健脾补肾方+顺铂组与荷瘤对照组相比较,均可抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长,经统计学处理分析有显著的差异(P<0.01),其抑瘤率分别为:32.79%、30.72%、45.81%,而其中健脾补肾方组与顺铂组之间比较并无显著性差异(P>0.05),健脾补肾方加顺铂组与其他治疗组比较有显著差异(P<0.05)。  2、各治疗组小鼠脏器指数与空白对照组相比,均有显著性差异(P<0.01);各治疗组与荷瘤对照组相比,均有显著性差异(P<0.05);健脾补肾方组、健脾补肾方加顺铂组分别与单纯顺铂组比较,均有显著性差异(P<0.05)。  3、健脾补肾方组、顺铂组及健脾补肾方+顺铂组小鼠肺癌移植瘤组织中 Fas阳性表达率高于荷瘤对照组(P<0.01);健脾补肾方加顺铂组与单用健脾补肾方组、单用顺铂组比较(P<0.05),均有显著性差异;而顺铂组与健脾补肾方组比较(P>0.05),无显著性差异。  4、健脾补肾方组、顺铂组、健脾补肾方+顺铂组的小鼠肺癌移植瘤组织中FasL阳性表达率与荷瘤对照组比(P<0.01),呈显著性差异;健脾补肾方加顺铂组与单用健脾补肾方组、单用顺铂组比较(P<0.05),有显著性差异;健脾补肾方组略高于顺铂组,经分析比较(P>0.05)无显著性差异。  结论:健脾补肾方能改善Lewis肺癌移植瘤小鼠一般情况,能直接抑制移植性Lewis肺癌瘤体的生长,保护小鼠正常免疫脏器,提高免疫功能,其机制可能与Fas/FasL系统诱导的肿瘤细胞凋亡途径有关。
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