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近些年来,蜂花粉因其富含丰富的活性物质,在食品和药品方面都有重要的应用,国内外对蜂花粉的需求日益增加,蜂花粉的安全性及功能性都受到了极大的关注。本研究主要是用高效液相色谱法对蜂花粉中功能性成分总抗坏血酸及安全性成分黄曲霉毒素进行了分析测定。本课题主要研究内容如下:(1)总抗坏血酸测定实验建立了溶剂提取-HPLC和MSPD-HPLC测定蜂花粉中的总抗坏血酸的方法,样品经5%偏磷酸或基质固相分散提取,与TCEP(还原剂)反应使脱氢抗坏血酸还原为抗坏血酸后,高效液相色谱法测定抗坏血酸含量,其中经过试验确定了油菜和莲花蜂花粉中还原剂TCEP的量分别为0.8mmol/L,1.2mmol/L。色谱分析中流动相为0.05%甲酸(pH=2.5)在35℃柱温,254nm波长下以0.8mL/min的流速进行等度洗脱;溶剂提取中分散器分散时间分别为30s和180s。MSPD前处理中选用C18做分散剂,C18∶蜂花粉=3∶1,5%MPA为洗脱剂,洗脱体积为10mL;结果表明:在0.000120.08mg/mL范围内线性良好,检出限为0.024mg/kg(S/N=3),而相比于MSPD,溶剂提取处理的结果更理想。(2)黄曲霉毒素测定建立了C18做分散剂,C18∶蜂花粉=3∶1,乙腈为洗脱剂,洗脱体积为10mL的MSPD-HPLC测定蜂花粉中黄曲霉毒素的测定方法,该方法色谱条件为流动相:甲醇∶水=43∶57,柱温:40℃,流速:0.8mL/min,进样量:10μL,激发波长:365nm,发射波长:425nm。实验得出蜂花粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2在2.2590,0.945,2.5100,1.0150.5μg/L线性范围内,四种毒素的检测限分别为0.40,0.22,0.36,0.25μg/kg,定量限分别为1.20,0.65,1.10,0.76μg/kg,回收率分别在80.97%87.08%,87.53%90.13%,79.65%85.89%,91.23%93.27%。该方法准确度和精密度良好。为快速、准确地测定花粉中黄曲霉毒素的含量提供了方法。