第一部分五酯胶囊对仑伐替尼药代动力学影响及机制研究目的:建立大鼠血浆中仑伐替尼的检测方法,研究五酯胶囊对仑伐替尼药代动力学影响;检测大鼠小肠及肝脏代谢酶及转运体的m RNA及蛋白表达水平,从分子水平探究其机制。方法:18只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为3组,包括仑伐替尼对照组（1.2 mg/kg）,低剂量五酯胶囊150 mg/kg联合仑伐替尼组和高剂量五酯胶囊450 mg/kg联合仑伐替尼组。五酯胶囊预处理7天,在第7天灌胃给予仑伐替尼,按照规定的采血点眼内眦静脉丛采血。乙酸乙酯用于处理血浆样品,同位素~2H5-仑伐替尼为内标用于定量,色谱柱为ZORBAX SB C18,0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源（ESI）、正离子、多反应监测（MRM）模式,测定大鼠血浆中仑伐替尼的药物浓度。非房室模型计算仑伐替尼的药代动力学参数。采用实时荧光定量PCR（RT-q PCR）测定大鼠肝脏CYP3A1、P-gp、BCRP及小肠外排转运体P-gp、BCRP的m RNA表达水平;并采用Western blot技术测定大鼠小肠外排转运体P-gp、BCRP的蛋白表达水平。结果:仑伐替尼在0.2-1000 ng/m L范围具有良好的线性关系,方法学各项均符合要求。药代动力学结果表明,低剂量五酯胶囊,使仑伐替尼的药时曲线下面积（AUC）,峰浓度(Cmax)有升高的趋势,表观分布容积（Vz）降低44.6%;高剂量五酯胶囊,使仑伐替尼的AUC增加62.7%,Cmax增加69%;而Vz降低48.9%,清除率（CLz）降低42.1%。低剂量五酯胶囊使小肠P-gp和BCRP的m RNA表达水平分别下降44.1%和49.5%,高剂量五酯胶囊使小肠P-gp和BCRP的m RNA表达水平分别下降60.3%和57.1%。而高剂量五酯胶囊使小肠P-gp蛋白表达下降65.6%。结论:本研究开发了一种快速、灵敏的超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）方法测定大鼠血浆中仑伐替尼的浓度,并成功应用于五酯胶囊对仑伐替尼药代动力学研究。研究发现,五酯胶囊可以影响仑伐替尼的药代动力学,使其体内暴露量增加。进一步研究表明,五酯胶囊可能通过抑制小肠P-gp来影响仑伐替尼的药代动力学。因此,当五酯胶囊与仑伐替尼联合应用时,应当加强对患者的监护。第二部分仑伐替尼与替米沙坦药物相互作用研究目的:建立一种同时测定大鼠血浆中仑伐替尼和替米沙坦的药物浓度UPLC-MS/MS方法,从药代动力学角度探究仑伐替尼与替米沙坦的药物相互作用。方法:分别单次给予雄性SD大鼠仑伐替尼、替米沙坦、仑伐替尼联合替米沙坦,仑伐替尼和替米沙坦的给药剂量分别为1.2 mg/kg,4 mg/kg。按照规定的采血点于眼内眦静脉丛采血,离心后得到血浆样品,血浆样品用乙腈沉淀蛋白处理。5 m M乙酸铵（0.1%甲酸）-乙腈（0.1%甲酸）为流动相,使用XSelect HSS T3色谱柱进行梯度洗脱,分离分析物。采用正离子,MRM模式,测定大鼠血浆中仑伐替尼和替米沙坦的药物浓度。非房室模型计算仑伐替尼和替米沙坦的药代动力学参数。结果:血浆中的内源性物质对分析物的测定没有干扰,仑伐替尼和替米沙坦分别在0.2-1000 ng/m L和0.1-500 ng/m L范围内线性关系良好。其精密度、准确度、基质效应、提取回收率和稳定性均符合要求。结果表明,仑伐替尼与替米沙坦同时给药后,替米沙坦对仑伐替尼的药代动力学无显著影响,而仑伐替尼使替米沙坦的AUC、Cmax显著降低,CLz明显加快。结论:本研究建立了一种简单、快速同时测定大鼠血浆中仑伐替尼和替米沙坦的药物浓度的UPLC-MS/MS方法,并成功的应用于两药相互作用研究。药代动力学结果表明,仑伐替尼减少了替米沙坦的体内暴露量。它可以为两种药物在临床上的联合使用提供重要参考。