朝鲜淫羊藿中性多糖结构分析及抗氧化活性研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gavin812428144
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目的:提取朝鲜淫羊藿多糖,根据电荷差异对其进行纯化,获得朝鲜淫羊藿中性多糖,分析其结构特征及体外抗氧化活性,进而探讨其构效关系。方法:1.通过水提醇沉的方法提取朝鲜淫羊藿粗多糖(EFPC),将得到的EFPC利用Sevage法除去蛋白,经DEAE离子交换柱得到朝鲜淫羊藿中性多糖(EFPN),将EFPN经Sepharose CL-6B凝胶层析分析柱进一步纯化得到纯化后的朝鲜淫羊藿中性多糖(EFPN-1);2.理化性质:糖含量测定、蛋白含量测定、糖醛酸含量测定、单糖组成分析;3.结构分析:运用红外光谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)、气质联用技术(GC-MS)及高效液相色谱法(HPLC)等方法对EFPN-1的结构进行解析;4.体外抗氧化实验:从金属离子螯合能力、清除和抑制自由基的能力和还原能力三个方面比较EFPN和EFPN-1的体外抗氧化活性。结果:1.EFPC、EFPN、EFPN-1的总糖含量分别为79.6%、87.1%、91.4%;EFPC、EFPN、EFPN-1的蛋白含量分别为0.05%、0.03%、0.08%,因样品进行过脱蛋白,蛋白含量符合标准;单糖组成的结果显示EFPC主要由Man、Rha、GlaA、Glc、Gal、Ara构成,百分摩尔比为0.9:1.0:1.2:1.5:1.1:1.8;EFPN由Man、Rha、Glc、Gal、Ara构成,百分摩尔比为0.6:1.0:1.4:1.6:1.7;EFPN-1则由Rha、Glc、Gal、Ara构成,百分摩尔比为1.0:6.8:1.8:0.7。2.通过甲基化分析、GC-MS分析、FT-IR分析、NMR分析等方法,分析出EFPN-1结构是以(1→4)-α-Glcp与(1→4,6)-α-Glcp为主链,(1→3,6)-α-Galp为分支,末端残基为Ara、Gal、Rha的均一性杂多糖。3.EFPN、EFPN-1在08 mg/mL范围内对羟基自由基有很好的清除作用,且EFPN-1的清除能力比EFPN好,清除率达到了90.05%;EFPN、EFPN-1在DPPH法中在0.050.4mg/mL浓度范围内清除作用良好,EFPN-1清除率达到了76.68%;金属离子螯合能力中EFPN-1螯合作用比EFPN好,EFPN-1金属螯合能力达到了85.25%;EFPN、EFPN-1在FRAP法中FRAP值分别为4.40、7.04 mmol FeSO4/g。结论:根据高效凝胶渗透色谱、甲基化和核磁共振谱的结果,EFPN-1是一种分子量为21.9 kD的支链多糖,含有60%以上的葡萄糖。其主干由(1→4)-β-D-Glcp与(1→4,6)-α-Glcp组成,(1→3,6)-α-Galp为分支。抗氧化实验表明,EFPN-1具有较强的抗氧化能力。以上表明EFPN-1是一种具有开发潜力的天然抗氧化剂。
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