中国人喉鳞癌EGFR突变基因的研究

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目的:研究中国人喉鳞癌EGFR基因突变情况。   方法:1.QIAamp DNA Mini Kit试剂盒法提取28例喉癌及其癌旁组织、10例声带息肉患者喉部正常组织DNA,采用突变富集PCR法提取新鲜组织标本中突变EGFR基因,通过EGFR基因突变液相芯片检测EGFR基因突变的情况,从而比较肿瘤组织与癌旁组织、肿瘤组织与喉部正常组织EGFR基因突变的差异;2. QIAamp DNA Mini Kit试剂盒法分别提取28例喉癌患者手术前、手术后第1天、手术后第5天和手术后第10天等不同时期共112份血清中的游离DNA,以突变富集PCR法富集EGFR突变基因,通过EGFR基因突变液相芯片的检测,观察肿瘤切除术前、术后EGFR基因突变的动态变化。   结果:1.喉部鳞癌标本28例,组织表达EGFR突变基因阳性者4例,占全部病例数的14.3%,4例突变均位于外显子20中,其中3例突变类型为T790M,另外1例突变类型则尚未明确;癌旁组织以及喉部良性病变正常组织中均未检测出EGFR基因突变;但是这种比较在统计学上没有显著性差异(P>0.05);2.112份血清样本中,术前血清只有1例检出EGFR突变基因,术后血清EGFR突变基因阳性者总共7例,其中6例突变位于外显子21,类型为L858R;1例突变位于外显子20,突变类型为T790M;这其中还有1例同时具有外显子20、21上突变,外显子21上为L858R,外显子20上突变类型则尚未明确。从时序上看,患者血清中EGFR基因突变似乎存在动态波动性,但绝大部分都出现在手术后第5天。但是,这些数据在统计学上仍然没有显著性差异(P>0.05)。   结论:1.虽然喉癌组织中4例存在EGFR突变(占全部病例的14.3%),但与癌旁组织、喉部正常组织比较无统计学意义(P>0.05),因此认为喉部鳞癌中EGFR基因突变可能仅是偶然现象,尚不能作为检测中、早期喉癌存在与否或者指导肿瘤靶向治疗的指标,需进一步扩大样本量深入研究。   2.血清中EGFR突变基因的动态变化虽然在统计学中无显著性差别(P>0.05),但我们认为可能系病例数太少所致,而创伤或者别的原因可能是血清游离DNA产生的可能机制。因此,血清游离DNA的来源机制有待进一步阐明。
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