RNAi特异性抑制胃癌细胞β-catenin基因表达的研究

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胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,具有发病率高、发病隐匿、易转移和死亡率高等特点。目前治疗方法主要有手术、化疗、放疗等,疗效均并不能令人满意;目前我国胃癌患者治疗后5年存活率仅为20—30%。癌基因的激活是肿瘤发病的根本原因之一,以抑制癌基因过度表达为重要内容的基因治疗成为新世纪人类攻克恶性肿瘤(包括胃癌)的重要研究方向。 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是将双链RNA(double strand RNA, dsRNAl导入细胞内引起同源mRNA降解的一种细胞反应过程。DsRNA进入细胞后被特异性dsRNA核酸酶(Dicer)切割成多个21-25bp的短干扰RNA(short interfering RNAs,siRNAs),siRNAs与一些核酸酶结合形成RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC),由RISC介导同源mRNA的降解,属于转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)的一种。短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)由短的正义链、反义链(21-25bp)和连接它们的数个碱基组成,因其形似发夹而得名。shRNA在胞质内也被Dicer切割成siRNAs,发挥对靶基因的抑制作用。shRNA可自身合成双链,其化学稳定性较siRNAs更高。另可直接在体外大量合成,易于筛选有效序列,为构建RNAi重组载体奠定基础。自从1998年被发现以来,作为有力工具,RNAi技术已被用于大肠癌、食管癌、肝癌、卵巢癌等多种人类肿瘤的研究,但应用其研究胃癌少见报道。 Wnt信号通路是细胞内重要的信号传导途径,该通路的高激活状态与多种人类肿瘤密切相关。β-catenin基因编码的β-连环蛋白是该通路的关键阳性调节因子。在正常情况下,细胞内肿瘤抑制因子APC蛋白、β-连环蛋白和GSK-3β等组成蛋白复合体,β-连环蛋白可在复合体内被磷酸化降解。APC或β-catenin基因的
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