高效液相色谱—串联质谱法测定血清中游离和结合型胆汁酸的方法学研究和临床应用

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目的:1.建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时测定血清中游离和结合型胆汁酸的方法。2.用HPLC -MS/MS法测定正常孕妇、轻度和重度妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)患者血清中胆汁酸,建立ICP的胆汁酸谱,用于ICP的诊断和分度诊断。方法:1.色谱条件:色谱柱:Waters Atlantis C18 (3.9×150 mm,5μm) ;柱温:25℃;流速:1 ml / min,分流比为1∶4 ;流动相A:含5 mmol/L醋酸铵和0.01%甲酸水溶液,B:含5 mmol/L醋酸铵和0.01%甲酸甲醇溶液,梯度洗脱;用三级四极杆串联质谱(MS / MS)进行检测,离子化模式为ESI-,采用多反应监测(MRM)模式,外标标准曲线法定量;检测时间10 min。2.用Chromabond C18 ec固相小柱萃取血清样品。3.用HPLC– MS / MS法测定53例正常孕妇,21例轻度ICP患者,22例重度ICP患者的血清胆汁酸。结果:
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