伪狂犬病(Pseudorabies，PR)又叫奥叶兹基氏病(Aujeszkysdisease，AD)，是由伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus，PRV)又名猪疱疹病毒Ⅰ型(SuiserpesvirusⅠ)所引起的多种家畜、野生动物、伴侣动物和实验动物的一种急性传染病。在自然条件下，本病最常见于猪、牛、羊、犬、猫和鼠类。临床上多以发热、骚痒(猪除外)和急性脑脊髓炎为主要症状。猪和鼠是此病的主要自然宿主和传染源。该病具有高度的传染性，一旦在猪群中出现，将很快通过空气或接触传染给其它猪只和猪场。近年来的研究表明伪狂犬病病毒还能通过乳汁和生殖道感染。特别是在规模化、集约化、现代化的高密度养猪地区，伪狂犬病病毒可在猪群间不断传播，危害尤为严重，除引起死亡和繁殖障碍外，该病还严重影响猪只的生长发育和生产性能，它不仅给养猪业造成了巨大的经济损失(在美国每年仅猪伪狂犬病造成的损失就达数百万美元)，而且它的存在使整个养殖业时刻面临着严重的威胁。PRV归属于α疱疹病毒亚科。目前世界上包括我国在内广泛使用的预防此病的疫苗均带有gE基因缺失的表型特征。 本实验根据PRVMin-A株gE基因序列，参考已发表的关于PRVgE蛋白抗原性表位的相关报道，利用PCR方法扩增了PRVgE基因不含信号肽和跨膜区的部分，并克隆到原核表达载体pGEX-6p-1，获得的重组质粒命名为pGEX-gE。用pGEX-gE转化受体菌BL21，用诱导剂IPTG以不同浓度进行诱导。经SDS-PAGE电泳分析证实克隆的部分gE基因获得了表达，融合表达产物大小约为63KD，并在终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导下，3.5h其表达量达到高峰。Wéstern-blot分析证实表达的重组gE蛋白具有抗原反应活性。将表达产物利用亲和层析法纯化后作为抗原。 　本试验依据目前国内所应用的伪狂犬疫苗均是gE基因缺失的表型特征。而野毒感染的PRY都含有gE基因这一事实，建立了一种快速、简易的分子鉴别诊断方法——鉴别胶体金免疫层析法(GICA)，用于猪血清中PRV抗体的监测，区分疫苗免疫的动物和自然感染PRV的动物。利用原核表达方法制备伪狂犬gE蛋白抗原，用全病毒抗原包被胶体金。依次将猪伪狂犬标准阳性血清、gE蛋白抗原和伪狂犬全病毒抗原标记在硝酸纤维素(NC)膜上制备成免疫胶体金检测板。检测时血清中PRV抗体与金标抗原结合，沿着NC膜层析移动，与NC膜上相应的配体结合后形成肉眼可见的紫红色斑点。经特异性交叉试验、阻断试验验证该方法特异性、灵敏度较高，利用哈兽研伪狂犬疫苗生产组提供的猪PRV高免血清进行灵敏度测试，并用间接ELISA法做同步对照，结果表明其灵敏度略低于间接ELISA法。此方法快速、简便、结果准确，可用于监测猪血清中的PRV抗体，具有适用价值。