microRNAs (miRNAs)是内源性非编码小RNA(大约21-25个核苷酸长度),来源于体内Pri-miRNAs和Pre-miRNAs。miRNAs通过不完全互补与靶标蛋白的3’端非编码区(3’untranslated region,3’UTR)结合,从而在转录后水平调节基因表达。miRNAs通过下调致癌基因或者抑癌基因mRNA水平发挥抑癌或者致癌的生物学作用。许多良恶性肿瘤中已相继发现miRNAs的基因位点及其表达模式,因此探索不同miRNAs的生物学功能具有重要的意义。miRNAs在肿瘤的侵袭和转移过程中也发挥了重要的作用。例如,miR-155参与TGF-β介导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)以及肿瘤细胞的侵袭和迁移。MiR-21已于多种肿瘤中被证实可以增加侵袭和转移的程度,包括乳腺癌,结肠癌,以及胶质瘤。TWIST1作为转录因子可以激活miR-10b,而后者又参与了TWIST1介导的上皮间质转化过程。肿瘤的侵袭和转移是判断肿瘤预后的主要病理指标,而miRNAs可以作为新的判断预后指标以及为临床治疗提供新的作用靶点,因此研究不同miRNAs在肿瘤发生进展中的特定作用十分重要。研究目的：miRNAs作为内源性非编码小RNA,在肿瘤的发生进展中发挥着重要的作用。在肿瘤细胞中多数miRNAs表达降低,功能受到抑制,提示其可能起到抑制肿瘤作用。然而,miRNAs抑制肿瘤的具体机制尚不明确。我们的实验目的在于研究miR-34b在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的作用以及作用机制。我们的研究发现肿瘤组织中相比邻近癌旁组织,miR-34b出现明显下降。体外功能实验证实miR-34b促进凋亡,抑制细胞增殖,从而发挥抑制肿瘤的作用。另外,我们还检测了miR-34b与靶标蛋白c-Met以及HGF/Met信号通路的相关性。研究方法：收集术后非小细胞肺癌与邻近的癌旁组织,并培养非小细胞肺癌细胞系A549与SPC-A-1.应用实时定量PCR技术检测非小细胞肺癌组织miR-34b的表达水平,并且分析其与临床病理参数之间的统计学意义。应用细胞转染技术获得miR-34b高表达细胞,并检测细胞凋亡与细胞增殖。运用免疫组织化学方法探索miR-34b表达与下游蛋白c-Met, p53以及Mdm2之间的相关性。对于miR-34b在非小细胞肺癌与邻近癌旁组织中的表达差异应用两样本t检验。应用Pearson卡方检验和Fisher精确检验来检验miR-34b表达水平与临床病理参数之间相关关系。应用等级相关检验来检验miR-34b表达水平与phospho-Met, p53(phospho S392)以及Mdm2相关关系。研究结果：miR-34b在非小细胞肺癌中低表达,并与淋巴结转移负相关(P=0.031). miR-34b通过诱导凋亡抑制肿瘤增殖。非小细胞肺癌中miR-34b表达与c-Met负相关(P=0.012)。结论：miR-34b影响肿瘤细胞的凋亡、增殖、转移,在肿瘤发展过程中发挥抑制肿瘤的作用；HGF-Met信号通路中p53磷酸化并增强转录活性,上调miR-34b,反馈抑制c-Met。由于p53信号通路参与细胞周期抑制与细胞凋亡,并于其中发挥重要作用,因此miR-34基因可能受到抑癌基因p53的调节,而p53可以通过miR34调节一系列的下游蛋白。另外,miR-34又可以反向作用于p53的mRNA,从而避免p53的连续激活。