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目的:利用土、苗少数民族地区资源丰富的药材,筛选具有清热、抗病毒作用明显的中草药,防治流感。在前期研究的基础上,将具有明显、且疗效稳定的抗病毒作用的中草药组成复方-清瘟化瘀汤,防治流感,治疗热毒壅肺、毒损肺络之证。本课题通过生物学实验,观察清瘟化瘀汤有效防治流感等上呼吸道感染性疾病的抗病毒、调节免疫、解热等作用情况。为《内经》关于外感热病的临床应用和进一步实验研究提供依据。同时,该研究有利于对传染病如“非典”等疾病的防治,更有利于土、苗少数民族地区资源丰富的道地药材的充分开发和利用,具有较大的经济效益和社会效益。
方法:1、体内抗病毒实验:用流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻感染小鼠,观察清瘟化瘀汤对感染小鼠肺指数、脾指数、肺组织病理影响及病毒致小鼠死亡率的影响;应用放射免疫法,观察细胞因子TNF-a、IL-8在感染小鼠血清中的表达水平。2、清瘟化瘀汤对感染小鼠吞噬功能的影响:通过碳粒廓清法,观察其对感染小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响。3、解热作用,应用干酵母致大鼠体温升高模型,观察清瘟化瘀汤对其致热前后体温变化的影响。
结果:FM1 株流感病毒感染小鼠后,清瘟化瘀汤各组对小鼠病毒性肺炎有明显抑制作用(与病毒对照相比,p<0.01),并具有正的效量关系,即在一定情况下,剂量越大,越能有效地抑制流感病毒所致小鼠肺炎;清瘟化瘀汤大剂量组的肺指数和肺指数抑制率与病毒唑组相比无明显差异(p>0.05),而与抗病毒口服液组相比有明显差异(p<0.05);实验各组脾指数无明显差异。在流感病毒FM1感染小鼠致肺炎过程中,TNF-a、IL-8水平较正常对照组显著提高(p<0.05),清瘟化瘀汤各组小鼠血清中TNF-a、IL-8水平较病毒对照组明显下降(P<0.05)。清瘟化瘀汤对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用研究,结果显示,病毒对照组死亡率达75%,病毒唑组死亡率为25%,与病毒对照组比较有明显差异(p<0.01);清瘟化瘀汤中、小剂量组死亡率分别为 31.25%、37.5%,均较病毒对照组为低(p<0.05,p<0.01),大剂量组死亡率为 50%,与病毒对照组比较疗效呈上升趋势,但无明显差异(P>0.05)。碳粒廓清试验中,病毒对照组单核巨噬细胞吞噬功能较正常空白组降低(p<0.05),清瘟化瘀汤各组K值和a值较病毒对照组高,尤其是清瘟化瘀汤大、中剂量组与病毒对照组相比有明显差异(p<0.05,p<0.01)。解热实验中,清瘟化瘀汤大、中剂量组在致热后3、6h的体温变化显著低于模型组(p<0.05、p<0.01)。
结论:清瘟化瘀汤可改善流感病毒FM1感染引起的小鼠肺炎症状,减轻感染小鼠的间质性肺炎的病理改变,能抑制感染小鼠血清中促炎性因子的表达水平;延长感染小鼠生命率;可提高流感病毒FM1感染小鼠的单核巨噬细胞吞噬功能;对酵母致大鼠体温升高具有明显的解热作用。由此提示,清瘟化瘀汤发挥了中药复方抗病毒的协同作用,通过抑制病毒增殖及调控免疫反应达到治疗效果。综观本方具有抗病毒、免疫调节、解热等作用,为临床应用和进一步实验研究提供了依据。