人HAS3启动子的结构与功能初步分析

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yohoban
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透明质酸合成酶3(Hyaluronan synthase 3,HAS3),是一个参与透明质酸合成的酶分子,在上皮形成和肿瘤转移等过程中起重要作用。为了进一步深入研究HAS3基因的转录调控机制,本研究克隆鉴定了HAS3基因的启动子。首先应用5’ RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了HAS3基因的转录起始位点,发现了丰度和转录起始位点不同的两种新的HAS3基因剪接变异体,通过PCR定向克隆策略,构建了覆盖HAS3基因5’端侧翼区起始密码子ATG上游约4.3 kb区域的一系列HAS3基因启动子荧光素酶报告基因重组体。启动子活性分析表明,HAS3基因启动子区域定位于主要转录起始位点附近约450 bp的区域内。转录因子结合位点分析结果表明,HAS3基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒以及C/EBP等其它潜在的转录因子结合位点,提示Sp1和C/EBP等转录因子可能参与HAS3基因的转录调控。
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