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目的:本实验观察地西泮(diazepam, DZP)对老年大鼠离体胸主动脉环静息张力的影响、对去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)、氯化钾(KCl)预收缩血管环的舒张作用,同时观察不同工具药对DZP作用的影响,探讨其作用机制。方法:采用离体血管张力实验方法。将大鼠颈椎脱臼处死后,开胸取出胸主动脉,置4℃的生理盐溶液(physiological salt solution, PSS)中,将其两端固定,仔细剔除周围脂肪组织,剪成长度约2～3 mm的血管环。将血管环用两根不锈钢微型挂钩从管腔穿过,水平悬挂在浴管内,下方固定,上方以一细钢丝连于张力换能器,经BL-420F计算机生物信号记录分析系统记录血管环的张力变化。浴管内含有通以100% O2、pH值为7.4、37℃的生理盐溶液,前负荷调为2g,平衡1h后开始实验。观察DZP对NE(10-6 mol/L)、KCl (30 mmol/L)诱发的老年大鼠离体胸主动脉环收缩作用的影响,并观察一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,10-4 mol/L)、环氧合酶抑制剂吲哚美辛(indometacin, 10-5 mol/L)、外周型苯二氮卓受体(peripheral benzodiazepine receptor, PBR)拮抗剂PK11195(10-6 mol/L)对DZP作用的影响,以及DZP对血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩的影响。结果:(1)DZP (10-6～3×10-4 mol/L)对静息状态下的血管环无明显舒张作用(P>0.05)。(2)DZP (10-6～10-4 mol/L)对NE诱发的血管收缩有浓度依赖性的舒张作用,其EC50为(3.45±0.81)×10-6 mol/L, Emax为(102.90±4.03)%。(3)DZP (10-6～10-4 mol/L)对由NE预收缩的去内皮的老年大鼠离体胸主动脉环有浓度依赖性的舒张作用,与内皮完整组比较,低浓度DZP(10-6, 3×10-6, 10-5, 3×10-5 mol/L)对NE预收缩的血管环的舒张作用显著减弱(P<0.01)。(4)在NE收缩达坪值之后,分别加入相应浓度的L-NAME、Indo或PK11195,可引起血管张力发生变化,当血管张力再次达坪值后累积加入DZP(3×10-6, 10-4 mol/L)。与溶剂对照组比较,L-NAME可显著减弱DZP(3×10-6 mol/L)对血管环的舒张作用(P<0.01),但不能阻断DZP(10-4 mol/L)的舒血管作用;Indo、PK11195对DZP(3×10-6, 10-4 mol/L)的舒血管作用均无明显影响(P>0.05)。(5)DZP(10-6～3×10-4 mol/L)对KCl诱发的血管收缩产生浓度依赖性的舒张作用,其EC50为(3.05±0.47)×10-5 mol/L,Emax为(106.64±2.71)%。(6)DZP(10-6～3×10-4 mol/L)对KCl预收缩的去内皮的老年大鼠离体胸主动脉环有浓度依赖性的舒张作用,与内皮完整组比较,低浓度DZP(10-6, 3×10-6, 10-5, 3×10-5 mol/L)对KCl预收缩的血管环的舒张作用显著减弱(P<0.05)。(7)在KCl预收缩血管环的基础上,分别加入相应浓度的L-NAME、Indo或PK11195,血管张力发生变化,当血管张力再次达坪值后累积加入DZP(3×10-5, 3×10-4 mol/L),与溶剂对照组比较,L-NAME可显著减弱DZP(3×10-5 mol/L)对血管环的舒张作用(P<0.05),但不能阻断DZP(3×10-4 mol/L)的舒血管作用,Indo、PK11195对DZP(3×10-5, 3×10-4 mol/L)的舒血管作用均无明显影响(P>0.05)。(8)在无钙的PSS液中(预加EGTA),分别用DZP(3×10-6, 10-4 mol/L)孵浴后,加入NE 10-6 mol/L可引起迅速而短暂的收缩,接着再加入氯化钙(CaCl2, 2.5mmol/L),与溶剂对照组比较,DZP(10-4 mol/L)显著减弱血管环对NE和CaCl2引起的收缩反应(P<0.01),DZP(3×10-6 mol/L)对血管环的收缩反应影响不明显(P>0.05)。结论:1、DZP对静息状态下的老年大鼠离体胸主动脉环不产生舒张作用。2、DZP对NE和KCl预收缩的老年大鼠离体胸主动脉环有浓度依赖性的舒张作用。3、低浓度DZP(10-6, 3×10-6, 10-5, 3×10-5 mol/L)对胸主动脉环的舒张作用具有内皮依赖性,与PGI2的合成和PBR无关,可能与内皮产生的NO有关。4、高浓度DZP(10-4, 3×10-4 mol/L)能直接抑制外钙内流和内钙释放而产生舒血管作用,与NO合成、PGI2合成和PBR均无关。