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目的：观察缺氧/复氧条件下星形胶质细胞缝隙连接蛋白的变化以及亚低温对其变化的影响，探讨星形胶质细胞缝隙连接蛋白与脑缺血的关系以及亚低温对脑缺血的保护机制。
方法：选取新生24小时内SD大鼠新鲜脑组织皮层，参照McCarthy等的方法加以改进进行星形胶质细胞原代培养，调整细胞密度为1.0x105/Cm2，接种子含胎牛血清培养基的培养瓶中，置于细胞培养箱内。7-8天后传代，传至第3代，细胞自然纯化后，用神经胶质纤维酸性蛋白免疫荧光鉴定星形胶质细胞(AC)，95％以上为阳性细胞，符合实验要求。将AC分为正常对照组(C)、缺氧/复氧常温组(H/R)、缺氧/复氧亚低温组(H/R+M)。用三气培养箱以95％N2、5％CO2造成细胞缺氧，记录缺氧损伤时间，缺氧8小时后分别调节温度37℃及32℃，开始记复氧时间。每组设复氧0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h，7个时间点，建立AC缺氧/复氧模型。应用MTT方法测定细胞活力。应用划痕标记染料示踪技术(SLDT)在激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)下测定缺氧/复氧各个时间点荧光黄染料(LY)扩散距离，以评定缝隙连接(GJ)功能。Western-blot法半定量分析Cx43、P-Cx43的表达情况，免疫荧光染色观察Cx43、P-Cx43表达情况。采用SPSS17.0统计软件包进行数据分析，多组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，组间两两比较用SNK法，两样本间比较用t检验，P＜0.05为有统计学意义。
结果：
1．体外纯化培养AC及GFAP鉴定结果：AC传至3代后，细胞胞体较扁而大，具有多而较粗大的突起，细胞形态不规则，轮廓清晰，GFAP免疫荧光染色显示红色。
2．MTT法检测细胞活力：亚低温组与对照组比较细胞吸光度下降，与常温组比较明显增加，细胞损伤减轻，差异有统计学意义(P＜0.05)。
3．(1)常温组：Cx43蛋白的表达量随时间变化没有显著改变。P-Cx43蛋白表达量在缺氧/复氧后呈现先增高后降低的趋势（P＜0.05），复氧2h达最高，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。缺氧后LY扩散距离较对照组无明显变化，复氧后出现先降低后增加的趋势，于复氧2h降至最低，与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)亚低温组：Cx43蛋白的表达量在缺氧8h后出现下降，复氧后2h降至最低，随后又开始逐渐升高（P＜0.05），与常温组及对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)。P-Cx43表达量的变化与Cx43呈现一致性。缺氧后LY扩散距离即开始下降，在各个时间点均较常温组减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论：
1．缺氧/复氧可以引起星形胶质细胞损伤，活力下降。亚低温可以改变损伤后细胞活力，减轻缺氧/复氧后星形胶质细胞的损伤。
2. 37℃缺氧/复氧后GJ功能的下降与P-Cx43水平的变化有关。3.32℃缺氧/复氧早期GJ功能的下降可能主要为亚低温抑制Cx43蛋白的表达，使蛋白水平下降；后期抑制作用降低，GJ功能逐渐恢复。