海洋多糖纳米复合物的构建及其负载脂溶性药物研究

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靶向药物递送系统能选择地将药物递送至目标病变部位,减少药物对正常组织的毒性和副作用。纳米粒子的粒径小、比表面积大,具有较高的反应活性和性能,作为药物载体可提高特定部位的细胞摄取,能显著提高药物的功效。而天然高分子材料生物相容性和生物可降解性好,并且降解后的最终产物可被生物体吸收。本文基于海洋天然多糖的优良性能,研究制备了几种天然多糖纳米递送系统,以脂溶性药物姜黄素为模型药物,考察了其传递药物的性能。主要研究内容及结果如下:(1)研究对壳聚糖进行氨基化修饰,增加了壳聚糖表面氨基的数量,得到了一种氨基化壳聚糖(AmCS),并采用叶酸(FA)进行靶向修饰后,通过离子交联法与三聚磷酸盐(TPP)相互作用,制备得到FA-AmCS-TPP纳米粒子。采用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅立叶变换红外分光光度法(FT-IR)、差示扫描量热法(DSC)和热重分析(TGA)对FA-AmCS-TPP纳米粒子进行了表征。研究结果表明,通过优化可以得到粒径小(175.2±0.99 nm)、分散均匀(PDI=0.217)且表面正电位高(+42.4 mV)的FA-AmCS-TPP纳米粒子,有利于携带抗肿瘤药物进入肿瘤细胞。实验还研究了FA-AmCS-TPP装载姜黄素的性能,考察了姜黄素(Cur)装载率(EE-Cur)以及Cur/FA-AmCS-TPP在模拟体液环境中的释放行为。结果表明,由0.10g AmCS、10.0 mg FA、10.0 mg TPP和15.0 mg姜黄素组成的Cur/FA-AmCS-TPP纳米粒子,其装载率EE-Cur达到94.26±0.91%,姜黄素在48小时的累积释放率为56.2%。另外,细胞实验表明,Cur/FA-AmCS-TPP纳米粒子对于肿瘤细胞具有良好的靶向能力,当姜黄素浓度达到25.0μg/mL时,该纳米粒子能造成较强的细胞毒性,肿瘤细胞的存活率不足40%。(2)研究制备了阴离子多糖κ-卡拉胶联合吐温80稳定的玉米醇溶蛋白纳米粒子(Κc-ZNPs),并采用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)和傅立叶变换红外分光光度法(FT-IR)对Κc-ZNPs进行了表征。结果表明,Kc-ZNPs以近似圆形的分散球体存在,在玉米醇溶蛋白含量不变的情况下,Κc-ZNPs纳米粒子的粒径、zeta电位和稳定性取决于κ-卡拉胶的用量。进一步优化实验发现,κ-卡拉胶用量为5.0mg和10.0 mg时,Κc-ZNPs的粒径更小(分别为250.1±0.9 nm和287.6±1.4 nm),且多分散性指数低(PDI,≤0.20);研究还发现,改变温度、盐离子浓度、pH以及储存时间,均未见明显的絮凝和沉淀。实验进一步研究了Κc-ZNPs装载姜黄素的性能,并考察载药纳米粒子在模拟体液中的释放。结果表明该纳米载体对姜黄素有良好的装载效果,且载药纳米粒子Cur/Κc-ZNPs在模拟胃液(SGF,pH 2.0)中能够减少姜黄素的释放(<40%),而在模拟肠液(SIF,pH 7.4)中能充分释放姜黄素。另外,细胞实验表明,Κc-ZNPs载体无毒,且能增强肿瘤细胞的摄取性,携带姜黄素后能有效造成细胞毒性,当姜黄素浓度为30.0μg/mL时,肿瘤细胞的存活率不足10%。
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