蛹虫草子实体虫草素、腺苷含量的影响因素研究

来源 :沈阳师范大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:zel0088
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蛹虫草是东亚地区最受欢迎的营养滋补品之一,由于相似的化学成分和药用功效被用作冬虫夏草的替代品。蛹虫草中富含多种活性物质,最重要的成分为虫草素。虫草素即3’-脱氧腺苷,是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素,具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、免疫调节、清除自由基等多种药理作用,以虫草素为主要成分的新药已在临床上试用于白血病的治疗,有着良好的临床应用前景。目前已知虫草素的主要来源为蛹虫草,很多企业将虫草素含量列为企业标准。虽然人工栽培蛹虫草子实体已经实现了产业化,但是产品质量和效果参差不齐。在“健康中国”的战略背景下,越来越多的企业关注产品的虫草素含量,而目前检测数据表明绝大多数蛹虫草子实体产品虫草素含量极低。本文通过研究蛹虫草子实体栽培培养基中各种营养因子、生长因子对虫草素含量的影响,对其栽培培养基进行优化,对蚕蛹虫草和小麦培养基子实体的多种有效成分含量进行了比较分析,检测了子实体不同发育阶段虫草素含量及虫草素合成关键基因表达量的变化,旨在为蛹虫草子实体的优质栽培提供理论基础。结果如下:1.对农业部部颁标准虫草素含量测定方法中样品处理方法进行了优化,发现样品超声提取时间以30min提取效果最佳,显著优于原标准中提取时间3 h,而且节省能源和时间。2.不同浓度蛹粉可显著提高虫草素含量,10%为最适宜添加量。在此浓度蛹粉添加基础上,小麦加鸡蛋的效果最好,其次为小麦,玉米含量最低;奶粉含量从作用效果和节约成本综合考虑,选取浓度为3g/L;蛋白胨浓度可以由原来的10g/L的基础培养基改为6g/L,二者作用效果一致,在生物统计学上无显著性差异。3.腺苷和三十烷醇对提高虫草素的含量有正相关作用,二者的最适浓度分别为2mg/mL和3mg/L。铁离子和锰离子均能促进虫草素的产生,添加的最佳浓度分别为0.05%和0.01%;随着最佳浓度锰离子的加入,虫草素的含量可达到对照组的1.4倍。4.对蚕蛹虫草和小麦基质子实体各种有效成分含量检测结果表明:蚕蛹虫草的子实体中虫草素含量最高,菌核中除了N含量较高,其他生物活性成分含量均为最低;蚕蛹虫草子实体与小麦基子实体相比,子实体中虫草素、类胡萝卜素、SOD活性和氮含量要优于小麦基子实体,腺苷、多糖、和甘露醇含量则低于小麦基子实体。5.虫草素合成的关键基因cpA与cpB,在发菌阶段到转色和原基形成阶段虫草素含量呈下降趋势与不同生长阶段虫草素含量变化的结论相符合。
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