辅酶Q产生菌的选育及其发酵条件优化的研究

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该文研究了利用紫外分光光度计测定辅酶Q<,10>的方法.该方法能迅速、准确的测定辅酶Q<,10>的含量.辅酶Q<,10>紫外标准吸收曲线的回归方程为y=0.0168x-0.0146(R<2>=0.9955),x为辅酶Q<,10>的浓度,y为吸光度.另外还研究了高效液相色谱测定辅酶Q<,10>的条件.研究并比较了皂化法、索氏提取-皂化法、索氏提取法提取辅酶Q<,10>的效果,其中以皂化法效果最好,得率最高.通过单因素实验和正交实验得到了豌豆根瘤菌生产辅酶Q<,10>的最佳培养基配方:葡萄糖20g/L,胰胨10g/L,酵母膏10g/L,CaCl<,2>6g/L,pH5.0.摇床发酵条件实验得到菌株的最适生长条件:pH5.0、温度30℃、接种量2﹪ (V/V)、装液量25mL(500mL 三角瓶)、培养时间24h.辅酶Q<,10>生物合成前体物的添加实验发现,适当添加对羟基苯甲酸钠和苯丙氨酸可以增加辅酶Q<,10>的生物合成.从野生菌R11.1723出发,先在琥珀酸培养基上划线分离得到产辅酶Q<,10>的菌株,然后采用亚硝基胍诱变处理,涂布培养于丁胺卡那霉素鉴别培养基上,经过发酵培养得到S-63、S-78、S-149三株菌株,辅酶Q<,10>产量达到9.2mg/L,且具有较好的遗传稳定性.利用硅胶柱分离纯化辅酶Q<,10>,能得到纯度为96.45﹪的辅酶Q<,10>产品.
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