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冻害和热害等温度逆境是影响我国柑橘生产的主要环境限制因子。研究温度逆境之下的生理生化反应,进而寻找出提高柑橘抗逆性的方法和途径,对于发展柑橘产业具有重大的理论和实际意义。本论文主要探讨了Ca2+调节柑橘对温度逆境的作用,旨在寻找出有效的提高柑橘抵御温度逆境能力的机理和途径。低温胁迫以三种田间成年柑橘树国庆一号(Citrus. reticulata Blanco cv. Guoqing No.1)、朋娜脐橙(C. sinensis Osbeck cv.Skagges Bonnaza)和宜昌橙(C. ichangensis Swingle)为试材,高温胁迫以田间成年柑橘树国庆一号(C. reticulata Blanco cv. Guoqing No.1)、朋娜脐橙(C. sinensis Osbeck cv. Skagges Bonnaza)和葡萄柚(C. paradisi Macq)为试材,将柑橘离体叶片进行低温(-5℃)胁迫和高温(50℃)胁迫,研究了不同浓度的外源Ca2+处理对柑橘在温度逆境条件下的一些生理尘化的反应机制,找出最佳的外源Ca2+浓度。另外,采用不同Ca2+处理的四种培养基培养的柠檬试管苗,研究其在不同的低温胁迫下的生理生化反应。主要结果如下: 1.柑橘叶片在低温胁迫下,可溶性糖含量与品种的抗冻性成正相关,抗冻性越强,平均含量越高。可溶性糖随外源Ca2+浓度增加而增加,其增加率与抗冻性呈反比,抗冻性越强,增加率越低;相关系数r=-0.9999。可溶性蛋白质含量也与品种的抗冻性成正相关,随外源Ca2+浓度增加其含量呈先升后降的趋势,抗冻性越强,增加率越低;相关系数r=-0.9459。 2.低温胁迫下,品种抗冻性越强,SOD、POD的平均活性越高。随外源Ca2+浓度增加,三个柑橘品种的SOD、POD活性都呈先升后降的趋势,当外源Ca2+浓度为10mmol.L-1时,SOD、POD活性最高,品种抗冻性越强,增加率越低。 3.低温胁迫下,品种抗冻性越强,MDA含量越低,不同品种间MDA的含量差异显著,随外源Ca2+浓度的增加,MDA含量呈先降后升的趋势,Ca2+为10 mmol.L-1时,MDA含量最低。说明适量的Ca2+可降低MDA的含量,减缓膜受损程度。品种抗冻性越强,降低率越高。 4.高温胁迫下,可溶性糖含量随外源Ca2+浓度的增加而增加,三品种间含量差异显著。可溶性蛋白质含量和SOD活性都呈先升后降的趋势,当外源Ca2+浓度为10 mmol.L-1时,SOD活性最高;当外源Ca2+浓度为20 mmol.L-1时,蛋白质含量最高。各品种对外源Ca2+敏感度差异较大,SOD活性越高,对Ca2+敏感度越低,增加率越低,相关系数r=-0.9966。高温胁迫下,三品种的MDA含量差异显著,随外源Ca2+浓度的增加,MDA含量呈先降后升的趋势,Ca2+浓度为20 mmol.L-1时,含量最低。这些结果都说明适量的Ca2+预处理可增强柑橘的抗热性。 5.不同的培养基培养试管苗,高钙培养基能促进试管苗的生长,抑制顶端自枯现象,延缓其衰老;而用EGTA、TFP处理的试管苗,萌发率低,生长受到明显抑制,顶端自枯现象严重,TFP处理的试管苗还能促进根的生长。证明Ca2+和钙调素对柑橘的生长发育有着较大的影响。 6.随着温度降低,不同处理的试管苗蛋白质含量变化趋势不同。TFP试管苗的含量呈先升后降的趋势,在刁℃达到最高;其它三种处理培养的试管苗蛋白质含量呈先降后升再降的趋势,在一12℃时达到最高,高钙试管苗蛋白质含量显著高于EGTA试管苗。随胁迫时间延长,含量呈先升后降的趋势;高钙试管苗可溶性蛋白含量显著高于对照试管苗的。这说明钙能提高可溶性蛋白质的含量,从而增加柠檬的抗寒,吐。 7.随着温度降低及胁迫时间延长,SOD、POD活性都呈先升后降的趋势。对照试管苗POD活性在一9℃达到最高,其它处理的两种酶活性都在一12℃达到最高,温度更低时,活性急剧下降,说明酶清除活性氧的能力减弱,膜受损严重。各处理间活性大小存在显著差异,高钙试管苗SOD活性显著高于其它处理的试管苗;POD活性结果与此相反。说明钙能增强SOD的活性。 8.随着温度降低,MDA含量呈先升后降再升的变化趋势。温度为一12℃时,MDA含量最低,温度更低时,MDA含量大幅度增加。EGTA和TFP处理的MDA含量差异不显著,都显著高于高钙处理和对照的,而对照处理的又显著高于高钙处理的。随胁迫时间延长,MDA含量增加,对照试管苗的MDA含量显著高于高钙试管苗的含量。说明低温胁迫促进了膜脂过氧化,钙可减轻膜脂过氧化程度。