LncRNA CACNA1C-AS2调控PSMD4对食管癌细胞增殖和侵袭的研究

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背景:作为消化系统常见的恶性肿瘤之一,食管癌早期缺乏典型的症状,由于容易发生转移,导致其死亡率高。近年来,Lnc RNA在肿瘤中发挥作用的研究越来越多,迄今为止,CACNA1C-AS2在食管癌中的报道至今尚无。另外,PSMD4在其它肿瘤中的研究已经被报道,但是PSMD4在食管癌中的研究报道少见。因此,本文旨在探讨CACNA1C-AS2在食管癌中的作用,以及通过调控PSMD4对食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及上皮间质转化(EMT)的影响,从而为食管癌的诊断和治疗提供理论依据。目的:探讨CACNA1C-AS2在食管癌中的作用,以及CACNA1C-AS2是否通过调控PSMD4影响食管癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力以及EMT。方法:通过TCGA数据库和q RT-PCR分析CACNA1C-AS2在食管癌组织中的表达水平,同时检测CACNA1C-AS2在正常食管上皮细胞和食管癌细胞株中表达水平。EC-9706和Eca-109细胞作为研究对象。q RT-PCR检测高表达和敲低CACNA1C-AS2后的转染效率。MTT实验、Transwell实验、流式细胞术和伤痕愈合实验检测CACNA1C-AS2对食管癌细胞生物学特性的影响。蛋白免疫印迹检测CACNA1C-AS2对EMT相关蛋白表达的影响。利用q RT-PCR分析PSMD4在食管癌组织与细胞中的表达水平以及细胞转染效率。敲低和高表达PSMD4后,检测食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力以及凋亡率。蛋白免疫印迹检测PSMD4对EMT相关蛋白表达的影响。q RT-PCR和蛋白免疫印迹检测CANCA1C-AS2对PSMD4表达的调控。共转染CACNA1C-AS2和PSMD4,检测食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及EMT相关蛋白表达水平的变化,从而探讨CACNA1C-AS2是否通过调控PSMD4来影响食管癌的发生和发展。结果:CACNA1C-AS2在食管癌组织和细胞中均低表达,上调CACNA1C-AS2抑制了食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,增高凋亡率,减少EMT相关蛋白的表达,沉默CACNA1C-AS2结果相反。在食管癌组织和细胞中PSMD4表达上调。敲低PSMD4,抑制了食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,凋亡率增加,减少EMT相关蛋白的表达,高表达PSMD4结果相反。高表达PSMD4可以部分中和因CACNA1C-AS2上调而导致的抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力以及减少EMT相关蛋白表达的作用,沉默PSMD4可以部分中和因敲低CACNA1C-AS2而导致的促进食管癌细胞增殖、迁移和侵袭以及增加EMT相关蛋白表达的作用。结论:CACNA1C-AS2在食管癌中低表达,CACNA1C-AS2不仅抑制食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,增加凋亡率,同时也抑制EMT。PSMD4在食管癌中表达上调,PSMD4增强食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,减少凋亡率,促进EMT。CACNA1C-AS2通过下调PSMD4的表达在食管癌细胞中发挥肿瘤抑制作用。
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