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DPAn-3（docosapentaenoic acid,本文中的DPA均指DPAn-3）是一种珍稀的高度不饱和脂肪酸（highly unsaturated fatty acid,HUFA,本文指EPA、DPA和DHA）,主要分布在海豹、海狗和海象等海洋哺乳动物的脂肪组织中,在鱼油中的含量很少。近期的研究表明DPA在调节脂类代谢、增强内皮细胞迁移以及抑制动脉硬化等方面具有比DHA和EPA更好的功效,但囿于其来源和分离技术的限制,长期以来,对DPA生物活性及相关机制的研究尚未系统开展。炎症是机体组织对内外环境有害刺激所产生的复杂生理和病理反应,是十分常见的基础病理过程,许多疾病（如心脑血管疾病、肿瘤、代谢综合征等）都与炎症有着密切的联系。HUFA在体内可以通过调控与炎症相关的代谢通路,调节炎症因子的合成,发挥较强的抗炎功效,且安全无毒副作用,开发潜力巨大。然而,目前HUFA抗炎活性的研究主要集中在EPA和DHA,对DPA的研究很少。本文以海豹油毛油为原料,通过精制及乙酯化得到海豹油乙酯,采用尿素包合法富集海豹油乙酯中的HUFA,制得HUFA浓缩物,在此基础上利用分子蒸馏技术富集HUFA浓缩物中的DPA和DHA,制得DPA、DHA浓缩物,再通过银离子络合法进一步富集DPA,最后通过制备液相色谱法制得DPA单体。随后分别以脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞（RAW264.7）和硫酸葡聚糖（dextran sulfate sodium,DSS）诱导的C57BL/6小鼠为炎症的体外和体内模型系统地研究了DPA的抗炎活性及机制,旨在为DPA的分离纯化及抗炎机制研究提供重要参考,研究的主要内容及结果如下:（1）为了得到稳定的、利于后期纯化的原料,首先对海豹毛油进行脱胶、脱酸、脱色、脱臭得到精制油,之后采用氢氧化钠-乙醇对其进行酯化处理得到海豹油乙酯,并以理化指标和脂肪酸组成为指标评价了精制和酯化对海豹油品质的影响。结果表明,精制和酯化可以显著降低海豹油中的水分及挥发性物质的含量和酸价,提高海豹油的皂化值及碘值,提升海豹油的品质,而对海豹油中EPA、DPA和DHA的含量没有影响。（2）采用尿素包合法对海豹油乙酯中的HUFA进行富集,并以HUFA的质量分数和得率为指标研究了不同尿酯比、结晶温度及结晶时间对富集效果的影响,在单因素试验的基础上通过响应面试验确定了最优的尿包工艺,制得HUFA浓缩物。结果如下,响应面法得出的最佳的HUFA的富集条件为尿酯比2.38:1,结晶温度12℃,结晶时间2.3 h。此条件下,得到产物中EPA,DPA,DHA的质量分数分别为28.97%,11.08%,31.30%,总得率为82.31%。（3）以尿素包合处理后的海豹油为原料,采用分子蒸馏技术对其中的DPA和DHA进行富集,然后用银离子络合法进一步富集DPA,并通过响应面法优化了络合参数,最后采用制备液相色谱法制得DPA单体。结果如下,分子蒸馏可以显著提高样品中DPA和DHA的质量分数,分别从11.60%,30.15%提高到21.24%,54.35%;硝酸银络合法可以显著提高DPA的质量分数,在优化后的操作工艺条件（油与AgNO3溶液的质量比为1:2.75,反应温度为8.5℃,时间为5 h）下,得到的产物中DPA的质量分数为37.42%,得率为88.21%;经过制备液相色谱得到DPA单体。（4）以LPS诱导的RAW264.7为炎症的体外模型,研究了DPA的抗炎活性,并和EPA和DHA进行了比较。MTT实验和Griess实验确定了LPS的作用浓度为0.8μg/mL,HUFA干预的低、中、高浓度分别为20μmol/L,40μmol/L和60μmol/L;采用Elisa法测定了RAW264.7上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的分泌量,在试验浓度范围内,EPA、DPA和DHA均可以有效抑制促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的合成,促进抗炎因子IL-10的合成,并且DPA在抑制IL-1β合成及促进IL-10合成方面更具特效。（5）采用Trizol法提取了RAW264.7的总RNA,并通过琼脂糖凝胶电泳和A260/A280对提取RNA的质量进行了评价,之后采用反转录试剂盒将RNA反转录为cDNA,最后利用实时荧光定量PCR（real time flurescent quantitive PCR,RT-qPCR）技术研究了不同浓度HUFA干预对炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10）基因表达量的影响。琼脂糖凝胶电泳图中,有两条明显的亮带,分别为18S和28S,其中28S要明显亮于18S,这说明提取的RNA完整,提取RNA的A260/A280值在1.852.05之间,说明RNA没有被蛋白、苯酚或其它杂质污染,也没有发生降解,满足后续反转录的要求。RT-qPCR的结果表明,EPA、DPA和DHA均可以显著下调促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6基因的表达,上调抗炎因子IL-10基因的表达,并且DPA可以更显著地下调TNF-α和IL-1β基因的表达,上调IL-10基因的表达。（6）以C57BL/6小鼠为研究对象,采用DPA对其进行干预并通过DSS诱导小鼠出现溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）,建立炎症的体内模型。以疾病活动指数,结肠长度及形态损伤评分,结肠组织苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,H&E）染色观察及病变评分等指标评价了DPA对UC的干预效果,结合髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性,炎症因子及炎症因子基因表达量等指标研究了DPA抗炎的分子作用机制,最后采用Western Blot法研究了DPA对NF-κB信号通路中IκB、p50和p65等关键蛋白磷酸化的影响,探究了DPA抗炎机制与NF-κB信号通路活化的内在关联。结果表明,DPA可以通过抑制NF-κB信号通路上IκB降解、抑制p50/p65的磷酸化及入核,调节促炎因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）的和抗炎因子（IL-10）之间的平衡,发挥强的抗炎活性,并且这种效果强于EPA和DHA。综上所述,海豹油经精制和酯化品质得到显著提升,而对样品中DPA含量的没有影响,尿素包合法可以显著提高样品中HUFA的质量分数,但不能实现HUFA之间的分离,分子蒸馏技术可以有效富集DPA和DHA,银离子络合法则可以显著提高DPA的质量分数得到DPA浓缩产物,经制备液相色谱得到DPA单体;体外和体内试验表明,DPA可以通过抑制NF-κB信号通路上的p50/p65入核,下调促炎因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）基因的表达,上调抗炎因子（IL-10）基因的表达,抑制LPS诱导的炎症细胞中及DSS诱导的UC小鼠体内炎症的发展,发挥了较强的抗炎活性。