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肺癌耐药是导致化疗失败的主要原因。研究发现肿瘤细胞耐药的分子机制很复杂,除了药物进入肿瘤细胞内浓度减少外,靶基因突变、扩增、DNA断裂修复加速、细胞抗/促凋亡基因表达差异等都会导致肿瘤细胞耐药,对肺癌耐药分子机制的进一步探讨和逆转肺癌耐药方法的研究已成为当今研究的热点。Ku70是Ku蛋白的组成成份之一,是DNA磷酸蛋白激酶的重要成分,参与DNA转录调节,可独立参与细胞抗凋亡及DNA修复。近年来的研究和我们的前期工作已证明,Ku70能够调控肿瘤细胞对放射线的敏感性;并与人肿瘤化学治疗耐受性密切相关。本研究尝试从封闭Ku70入手,通过RT-PCR方法、Western-blot方法、微阵列PCR基因芯片(PCR-Array)技术、MTT法、流式细胞术及分光光度法等,进一步探讨Ku70与细胞凋亡、肺癌耐药的关系;探讨封闭Ku70通过调控抗/促凋亡基因的表达,促进细胞凋亡进而改变肺癌的耐药性,以期为临床逆转肺癌耐药,提高化疗疗效寻找新靶点和途径。实验结果表明:Ku70不仅与部分抗/促凋亡相关基因共同参与了肺癌耐药的形成,并且证明了Ku70可作为上游调控点调控部分抗/促凋亡基因的表达,影响肿瘤细胞的耐药性;通过细胞膜电位的改变、Caspase-3活性变化、线粒体凋亡途径及细胞形态学的改变等进一步明确沉默Ku70后耐药的肺癌细胞A549DDP细胞对化疗药物的敏感性明显增加,细胞呈促凋亡状态,细胞的耐药性明显下降。Ku70可能成为临床监测肿瘤耐药性变化的一个指标。首次将Ku70与细胞凋亡、肿瘤耐药联系起来,探讨Ku70通过细胞凋亡途径参与肿瘤耐药的分子机制及逆转耐药的可能途径。采用先进的、PCR-Array基因芯片技术,明确了Ku70与抗/促凋亡相关基因的关系。应用小分子RNA干扰技术封闭Ku70,证明了Ku70可作为上游调控点调控部分抗/促凋亡基因的表达,影响、甚至逆转肿瘤细胞的耐药性。通过多种临床简便、易行的手段从细胞形态学、药代动力学及电生理学等不同角度,证明沉默Ku70后耐药的肺癌细胞对化疗药物的敏感性明显增加,细胞凋亡增多,肺癌细胞的耐药性得以逆转。本研究提示Ku70可能成为临床监测肿瘤耐药性变化的一个指标,并提供了逆转肺癌耐药的一个新靶点。