论文部分内容阅读
放疗是肿瘤三大治疗手段之一,其对肿瘤细胞的杀伤作用分为直接作用和间接作用,其中间接作用是指射线通过产生活性氧自由基来杀死肿瘤细胞,是主要作用。不同肿瘤细胞的射线敏感性有所不同,这种差异可能来自细胞本身。本文使用了三种放射敏感性不同的细胞,用western杂交与荧光免免疫组化的方法观察了不同剂量X射线和12C离子对三种不同细胞中NADPH氧化酶的两个亚基gp91phox与p47phox表达与对其活性的影响,为NADPH氧化酶与肿瘤细胞的放射敏感性之间的关系提供了依据,为使用基因治疗改变肿瘤的放射敏感性提供了新的思路。研究结果:1、使用MTT法测定人肝癌细胞系HepG2,人子宫颈癌细胞系HeLa,人肺腺癌细胞系GLC-82经过2Gy的X射线照射后的细胞存活分数(survival fraction at twogrey,SF2),测定得出三种细胞经过射线照射后存活分数有差异,说明三种细胞的放射敏感性不同,分别为肝癌最低,宫颈癌居中,肺癌最高。2、三种细胞经过X射线照射后细胞内的活性氧水平均显著升高,并且这种活性氧水平的增高可以被NADPH氧化酶的抑制剂DPI所抑制,说明NADPH氧化酶在x射线引起的细胞内活性氧增加的过程中起重要的作用。3、用荧光免免疫组化的方法观察NADPH氧化酶的活化,结果表明X射线和12C离子都可以激活NADPH氧化酶,但作用效果有差异,12C离子的作用效果明显强于X射线。4、通过western杂交测定NADPH氧化酶的两个亚基gp91phox与p47phox表达量的变化,结果表明辐照可以引起膜结合亚基gp91phox表达量的增加,但并没有引起胞质亚基p47phox表达量升高,说明p47phox的作用与其表达量没有直接关系。用同一剂量12Gy的X射线照射三种放射敏感性不同的细胞,结果显示不同敏感性的细胞的膜结合亚基gp91phox表达量有差异,从一定程度上说明NADPH氧化酶与肿瘤细胞的放射敏感性有关。